Question

为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。

（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用 技术从陆地棉基因文库中获取酶

D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，所含三种限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切

点如下图所示。则用 和 酶处理两个基因后，可得到 端与

端（填图中字母）相连的融合基因。

（2）将上述融合基因插入右上图所示Ti质粒的T-DNA中，构建 并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含 的固体培养基上培养得到含融合基因的单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的侵染液。

（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是 。

（4）进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过 技术，可培育成转基因油菜植株。用 法在分子水平上可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。

Answer 1