Question

【题目】回答下列关于遗传信息的表达和生物工程问题：

图（1）为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图（2）表示质粒，图（3）表示目的基因及限制酶切点。请回答下列问题：

（1）图（1）中限制酶EcoRⅠ的特点是______。

（2）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是______。

（3）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含______基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。按此要求，成功导入重组质粒的大肠杆菌具有的特点是______

A．能在含有青霉素的培养基上生长

B．能在含有四环素的培养基上生长

C．在含有青霉素的培养基上不能生长

D．在含有四环素的培养基上不能生长

（4）为了获得含重组质粒的单个大肠杆菌的菌落，常用的接种方法是______。

（5）若该目的基因合成的是脂肪酶，在生产提纯分泌型脂肪酶工程中，加入硫酸铵使酶与其他杂质分离，该过程属于酶分离提纯步骤中的______。

A．过滤酶

B．干燥酶

C．层析酶

D．沉淀酶

Answer 1

【答案】特异性识别和切割DNA PstⅠ、EcoRⅠ 抗四环素 B、C 平板划线法或稀释涂布平板法 D

【解析】

1、基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

2、基因工程的工具：

（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。

（1）图（1）中限制酶EcoRⅠ的特点是特异性识别和切割DNA（特异性识别GAAATTC和切割DNA中鸟嘌呤脱氧核苷酸和腺嘌呤脱氧核苷酸之间的键）。

（2）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，又使四环素抗性基因不被破坏，应该选择的限制酶是 PstⅠ、EcoRⅠ。

（3）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含抗四环素基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。按此要求，成功导入重组质粒的大肠杆菌具有的特点是能在含有四环素的培养基上生长但在含有青霉素的培养基上不能生长。

（4）为了获得含重组质粒的单个大肠杆菌的菌落，常用的接种方法是平板划线法或稀释涂布平板法。

（5）生产提纯分泌型脂肪酶工程中，加入硫酸铵使酶与其他杂质分离，该过程属于酶分离提纯步骤中的沉淀酶