[题目]图1.图2中标注了相关限制酶的酶切位点.且限制酶的切点是唯一的.外源DNA插入会导致相应的基因失活.请回答下列问题.(1)基因工程中最常用的载体是 .而作为基因表达载体.除图1所示结构外.还需具有 .(2)根据图中所给信息.构建基因表达载体时.应选用的限制酶是 .若将基因表达载体导入大肠杆菌.一般用处理.使其处于 .以利于吸收周围环境中的DNA分� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，且限制酶的切点是唯一的，外源DNA插入会导致相应的基因失活，请回答下列问题。

（1）基因工程中最常用的载体是_______，而作为基因表达载体，除图1所示结构外，还需具有___________________________。

（2）根据图中所给信息，构建基因表达载体时，应选用的限制酶是__________________。若将基因表达载体导入大肠杆菌，一般用____________处理，使其处于_____________，以利于吸收周围环境中的DNA分子。

（3）为了筛选含目的基因的大肠杆菌，应在培养基中添加______________，培养一段时间后，平板上长出的菌落，用PCR技术鉴定时，所用的引物组成为图2中_____________。

【答案】质粒目的基因和终止子 BclI和HindⅢ Ca2+ 感受态四环素引物甲和引物丙

【解析】

本题考查基因工程，考查对基因工程的工具和操作步骤的理解和识记。图1中氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因为标记基因，根据目的基因两端限制酶的酶切位点和标记基因中的酶切位点可选择适宜的限制酶，保证基因表达载体中至少一个标记基因正常表达。

（1）质粒是基因工程中最常用的载体，作为基因表达载体，一般应具有启动子、终止子、目的基因和标记基因，图1结构中缺少目的基因和终止子。

（2）根据图中所给信息，两个标记基因中均含有BamHⅠ的酶切位点，因此构建基因表达载体时，不能选用该酶，应选用BclI和HindⅢ。将基因表达载体导入大肠杆菌，一般用Ca2+处理，增大其细胞壁的通透性，使其处于感受态，以利于吸收周围环境中的DNA分子。

（3）基因表达载体中，目的基因的插入导致氨苄青霉素抗性基因失活，但四环素抗性基因可以正常表达，筛选含目的基因的大肠杆菌，可在培养基中添加四环素。用PCR技术鉴定受体菌是否含有目的基因，所用的引物应分别与目的基因两端的单链配对，引物应为图2中的引物甲和引物丙。

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细胞来源	胎儿	中年人	老年人
增殖代数	50	20	2~4

实验Ⅱ：分别将鼠、鸡、人和龟的体细胞在体外培养，结果如图所示。

实验Ⅲ：将年轻细胞的细胞核移植到去核的年老细胞中，在体外培养重组细胞，结果重组细胞分裂活动增强；将年老细胞的细胞核移植到去核的年轻细胞中，在相同条件下培养重组细胞，结果重组细胞分裂活动减弱。

（1）实验Ⅰ说明随着生物体年龄的增长，细胞分裂能力________。

（2）实验Ⅱ说明______________________________。

（3）实验Ⅲ说明__________________。

（4）根据上述实验可知影响细胞衰老的因素有______________等。

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（1）一个细小物体若被显微镜放大50倍，这里“被放大50倍”是指放大该标本的_____________________。

（2）在用显微镜观察玻片标本时，如果要观察的物像位于视野的左上方，应向__________移动玻片，方能使要观察的物像位于视野的中央；在玻片上写一个字母“b”，则在显微镜的视野中观察到的是“__________”。

（3）如图是显微镜下观察到的几种细胞或组织图像（D中细胞取自猪的血液）。

科学家依据______________________________________________________________________________将细胞分为原核细胞和真核细胞，属于原核细胞的是__________（填标号）。图中能进行光合作用的是__________（填标号）。

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（1）减数第一次分裂的前期可分为如图1所示5个亚时期，其中偶线期和粗线期可见同源染色体发生___并形成四分体。减数第一次分裂过程中，非同源染色体的____________________及同源染色体中__________之间的交叉互换会导致配子基因组合的多样性。

（2）小鼠卵原细胞在胚胎期就开始了减数第一次分裂，但在出生前后被阻滞在双线期之后、浓缩期之前的一个漫长的静止阶段（称为核网期）。研究发现，在此过程中，细胞中的环腺苷酸（简称cAMP）含量逐渐上升，达到峰值后维持在较高水平。在雌性小鼠性成熟后，卵母细胞才少量分批继续进行减数分裂。

①cAMP被称为细胞内的第二信使。如图2所示，当信号分子与_________结合后，通过G蛋白激活酶A，在其催化下由_________生成cAMP，作用于靶蛋白，调节细胞的生理过程。

②实验一：不同条件下体外培养特定时期的卵母细胞，实验结果如图3所示。由此可知，cAMP调控了细胞的减数分裂进程，判断依据是__________________。

③已知卵母细胞进入粗线期时，在显微镜下可观察到联会复合体蛋白（简称S蛋白）沿染色体轴分布，进入核网期时，S蛋白则已完全从染色体上解离下来，研究人员猜测cAMP调控减数分裂进程的靶蛋白可能是S蛋白，并对此展开进一步研究。

实验二：选取待定时期的胚胎卵巢，实验组注射混有台盼蓝的干扰S基因表达的RNA（台盼蓝用于指示注射成功与否），则对照组应注射__________________。经处理后分别进行细胞培养，3天后，实验组有67.0%的卵母细胞进入了核网期，对照组只有31.7%的卵母细胞进入核网期，证明干扰S基因的表达会______小鼠卵母细胞提前进入核网期。

实验三：体外培养特定时期的卵母细胞，实验组添加酶A抑制剂，一段时间后，实验组中可观察到S蛋白沿染色体轴分布的卵母细胞为68.7%，对照组的相应数据为39.0%，表明cAMP会_________S蛋白与染色体的解离。

④结合图2及上述一系列实验结果推测，cAMP调控减数分裂进程的机制为_________________。

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