Question

以小鼠为对象进行下列各项研究工作，请分析回答问题．
（1）在小鼠体细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长时会出现

 

现象而停止分裂增殖，此时瓶壁上形成细胞层数是

 

．
（2）体外受精之后，精核与卵核融合之前，用微型吸管除去雄核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠．这种方法在动物新品种选育中的显著优点是

 

．
（3）培育转基因小鼠时，通常以

 

作受体细胞，为使外源基因在后代中长期保持，可将转基因小鼠体细胞的

 

转入

 

细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体．
（4）动物细胞培养过程中添加

 

来防治污染；若保存细胞，通常在

 

条件下，因为在这种条件下，细胞中

 

的活性降低，细胞代谢速率降低．
（5）单克隆抗体的制备中，应将

 

细胞注射到小鼠腹腔，从

 

中获得特异抗体．

Answer 1

考点：动物细胞与组织培养过程,单克隆抗体的制备过程

专题：

分析：1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．
2、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁．细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．
3、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精．动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物．
4、单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体．

解答： 解：（1）在小鼠体细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长时会出现接触抑制现象而停止分裂增殖，此时瓶壁上形成细胞层数是单层（或一层）．
（2）处理后的受精卵由于只有雌核，而细胞松弛素B处理作用类似于用秋水仙素处理植物细胞，所以处理后的受精卵染色体数目将加倍，这种方法在动物新品种选育中的显著优点是容易获得纯合子并缩短育种时间（同植物的单倍体育种）．
（3）培育转基因小鼠时，通常以受精卵作受体细胞，为使外源基因在后代中长期保持，可将转基因小鼠体细胞的细胞核转入去核卵母细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体．
（4）动物细胞培养过程中添加抗生素来防治污染；若保存细胞，通常在液氮（或冷冻）条件下，因为在这种条件下，细胞中酶的活性降低，细胞代谢速率降低．
（5）单克隆抗体的制备中，应将产生特异抗体的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，从腹水中获得特异抗体．
故答案为：
（1）接触抑制    单层（或一层）
（2）缩短获得纯合体的时间（或类似答案）
（3）受精卵        细胞核         去核卵母
（4）抗生素     液氮（或冷冻）       酶
（5）产生特异抗体的杂交瘤           腹水

点评：本题综合考查动物细胞培养、核移植和单克隆抗体的相关知识，重点考查动物细胞培养的相关内容，要求考生识记动物细胞培养的过程、条件和应用等知识，能灵活的运用所学的知识解答问题．动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO₂．