Question

回答基因工程的有关问题：(共9分)

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生_____末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_____（相同，不同）黏性末端的限制酶。

（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因等，其中RNA聚合酶识别和结合的部位是_____。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用_____处理大肠杆菌，以利于表达载体进入。为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用放射性同位素标记的______ 作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为______。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成胰岛素，常用______          技术。

(3)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的______上。

 

Answer 1

【答案】

（1）平   相同（2）启动子    Ca²⁺    目的基因（或胰岛素基因）   分子杂交技术  抗原-----抗体杂交（3）T—DNA    染色体DNA

【解析】

试题分析：用限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生平口末端。若要在限制酶基因工程中，往往采用同种限制酶切割目的基因和质粒以产生相同的黏性末端，再用DNA连接酶使其直接进行连接。RNA聚合酶识别和结合的部位是启动子。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用Ca²⁺处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，以利于表达载体进入。为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可采用分子杂交技术，即用放射性同位素标记的胰岛素基因作探针与mRNA杂交；了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成胰岛素，可采抗原-----抗体杂交技术。如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T—DNA中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体DNA上。

考点：本题考查基因工程的相关内容。

点评：本题意在考查考生的识记能力，属于容易题。