Question

【题目】人类疾病的转基因生物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠（2N）制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示（注：基因B为高血压相关基因）。

（1）在上述转基因大鼠的培育过程中，涉及的现代生物技术有____________（写出两项即可）。

（2）体外扩增目的基因B可利用_____________技术，该技术的基本原理是___________，

（3）如果要建立高血压转基因动物模型，就要检测高血压相关基因是否已成功表达，在分子水平上检测到相应____________，在个体水平上大鼠出现____________症状，证明相关基因已成功表达。

（4）基因B在导入受精卵之前要构建_________________，这个步骤是基因工程的核心，构建出的分子除含目的基因外，还必须含有_________________。转基因大鼠的胚胎在代孕母体内能够存活的生理学基础是_______________。

Answer 1

【答案】基因工程、早期胚胎培养、核移植和胚胎移植 PCR DNA双链复制 蛋白质 高血压 基因表达载体 启动子、终止子、标记基因 代孕母体对供体胚胎不发生免疫排斥反应

【解析】

1、分析题图：图示是利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程图。图中包括体外受精过程、采用转基因技术将目的基因（基因B）导入受精卵的过程、早期胚胎发育过程以及胚胎移植过程。

2、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

3、基因表达载体的构建：①过程：用同一种限制酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。②目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。③基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。

4、PCR技术扩增目的基因：①原理：DNA双链复制；②过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。

（1）在题图转基因大鼠的培育过程中，②过程涉及基因工程技术，③过程涉及早期胚胎培养技术，④⑤过程涉及核移植技术，将重组细胞发育成早期胚胎导入到代孕鼠中涉及胚胎移植技术。

（2）可以采用PCR技术对目的基因进行体外扩增，原理是DNA双链复制。

（3）子代大鼠如果检测到高血压相关基因表达的蛋白质，即可在分子水平上说明高血压相关基因成功表达，子代大鼠如果检测到高血压疾病，即可在个体水平上说明高血压相关基因成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。

（4）基因B在导入受精卵之前要构建基因表达载体，这是基因工程的核心，构建出的分子除含目的基因外，还必须含有启动子、终止子、标记基因。转基因大鼠的胚胎在代孕母体内能够存活的生理学基础是代孕母体对供体胚胎不发生免疫排斥反应。