Question

8．绒山羊所产山羊绒因其优秀的品质被专家称作“纤维宝石”，是纺织工业最上乘的动物纤维纺织原料．毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关．图1表示含KIFⅡ基因的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2是获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程图（SmaI识别的碱基序列和酶切位点为CCC↓GGG）．请分析回答

（1）用SmaI完全切割图甲中DNA片段，其最短的产物含537个bp．
（2）上述工程中，KIFⅡ称为目的基因；为了提高试验成功率，需要通过PCR（聚合酶链反应）技术进行体外扩增，以获得更多的KIFⅡ．
（3）过程①必须用到的工具酶是限制酶、DNA连接酶；在过程③中，为了获得更多的卵（母）细胞，需用促性腺激素处理成年母绒山羊．
（4）过程④称为核移植，进行过程⑤的最佳时期是桑椹胚期或囊胚期．

Answer 1

分析 分析图1：图中DNA片段含有2个限制酶SmaⅠ切割位点，可被限制酶SmaⅠ切割产生长度为534+3=537bp、796-3-3=790bp、658+3=661bp的三中DNA片段．
分析图2：：图示表示获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程图，其中①表示基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶和DNA连接酶；②表示动物细胞培养过程，该过程需要采用胰蛋白酶处理组织块以获得单个细胞；③表示卵母细胞的采集和培养过程；④表示核移植过程；⑤表示胚胎移植过程．

解答 解：（1）SmaI限制性核酸内切酶识别切割的碱基序列CCC↓GGG，由图可知在SmaI的作用下完全切割可得到三个片段，长度为534+3=537bp、796-3-3=790bp、658+3=661bp的三中DNA片段，其中最短的长度为537个bp．
（2）KIFⅡ属于目的基因，基因体外的扩增常用PCR技术．
（3）过程①是构建基因表达载体，此过程必须用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶．为了获得更多的卵（母）细胞，需用促性腺激素处理成年母绒山羊，让其超速排卵．
（4）过程④是将细胞核导入卵母细胞属于细胞核移植范畴；过程⑤属于胚胎移植，胚胎移植的时期通常在桑椹胚期或囊胚期．
故答案为：
（1）537       
（2）目的基因       PCR（聚合酶链反应）   体外
（3）DNA连接酶 限制酶   促性腺激素 
（4）核移植  桑椹胚期或囊胚期

点评 本题结合转基因山羊培育过程图，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记所列知识要点，能准确判断图中各过程的名称，并能在较简单的情境中使用，属于考纲识记层次的考查．