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    【题目】真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有。原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。有人利用RT—PCR技术(mRNA逆转录为 cDNA再进行PCR扩增），获得了牛基因G，导人到大肠杆菌中，成功表达出G蛋白。请回答下列问题：

    （1）RT-PCR过程需要的酶有___________。进行PCR扩增的前提是_______，以便能够设计出需要的________种引物序列。

    （2）在构建基因表达载体时，RT—PCR的产物和PBV载体都要经过BamH I和 EcoRI两种酶切后再连接，目的是_________(答出两点）。

    （3）若要检测基因G是否翻译出蛋白G，可采用的检测方法是___________。有人从牛的基因组文库中获得了基因G，同样以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白G，其原因是________。

    【答案】逆转录酶和Taq酶（热稳定DNA聚合酶） 要有一段已知目的基因的核苷酸序列 2 防止目的基因（载体）自身连接，防止目的基因与运载体反向连接 抗原一抗体杂交 从基因组文库获取的G基因有内含子，在大肠杆菌中，其转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出蛋白G

    【解析】

    1、真核生物的基因编码区是不连续的，含有内含子和外显子，内含子和外显子都会转录产生相应的RNA，但内含子转录来的RNA被切除产生的RNA为mRNA，之后翻译产生相应的蛋白质。原核生物的基因编码区是连续的，不含有内含子和外显子，编码区直接转录产生相应的RNA，之后翻译产生相应的蛋白质。

    2、基因工程的基本步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

    （1）根据题意可知，RTPCR技术是mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增的过程，其中逆转录过程需要逆转录酶的催化，而PCR技术需要Taq酶（热稳定的DNA聚合酶）的催化。进行PCR扩增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便能够设计出需要的2种引物序列。

    （2）在构建基因表达载体时，与单一酶切相比，双酶切可以防止目的基因（载体）自身连接，也可以防止目的基因与运载体反向连接。

    （3）若要检测基因G是否翻译出蛋白G，可采用抗原抗体杂交；有人从牛的基因组文库中获得了基因G，同样以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白G，是因为从基因组文库获取的G基因有内含子，在大肠杆菌中，其转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，因此无法表达出蛋白G。

    练习册系列答案
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    【题目】下列有机物的检测试验中，导致试验失败的操作是

    ①脂肪鉴定时，花生子叶染色后，没有用50%的酒精洗去浮色 ②蛋白质鉴定时，把双缩脲试剂A液、B液混合后再加入蛋白质样液中 ③还原糖检测时，用50—60℃水浴加热 ④淀粉检测时，直接把碘液加到淀粉样液中 ⑤检测还原糖选用西瓜作为试验材料

    A.①②⑤

    B.②④⑤

    C.③④⑤

    D.①②④

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    【题目】某成年人处于高温炎热的环境中，体温维持正常，该过程中不会出现的是

    A. 抗利尿激素分泌增加

    B. 机体散热量等于产热量

    C. 下丘脑感受到体温变化，通过神经-体液发送信息

    D. 人体骨骼肌细胞中产热量最多的部位是细胞质基质

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    【题目】在探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的催化作用时，实验人员设置了如下方案，下列叙述正确的是

    试管编号

    ①

    ②

    ③

    ④

    ⑤

    ⑥

    2ml3%的淀粉溶液

    +

    +

    +

    -

    -

    -

    2ml3%的蔗糖溶液

    -

    -

    -

    +

    +

    +

    1ml2%的淀粉酶溶液

    +

    +

    +

    +

    +

    +

    温度（℃）

    40

    60

    80

    40

    60

    80

    802ml斐林试剂

    +

    +

    +

    +

    +

    +

    砖红色颜色深浅

    ++

    +++

    +

    -

    -

    -

    注：“＋”表示有；“－”表示无；最后一行“＋”的多少表示颜色的深浅。

    A.②④对照，可用来验证酶的专一性

    B.由①②③对照可推测出淀粉酶的最适温度为60 ℃

    C.本实验的变量有一个：实验的反应温度

    D.本实验的实验原理之一是斐林试剂与还原糖反应产生砖红色沉淀

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】实验材料的选取对实验成功非常关键。研究人员用30％蔗糖溶液对洋葱鳞叶、紫鸭跖草叶片和紫色大蒜鳞叶等进行质壁分离实验，结果如下表。下列说法正确的是

    比较项目

    洋葱

    紫鸭跖草

    大蒜

    观察部位

    鳞叶外表皮

    叶片外表皮

    鳞叶

    细胞颜色

    紫色

    紫色+绿色(有保卫细胞)

    紫色

    细胞大小

    大

    适中

    适中

    质壁分离程度

    0.29

    0.22

    0.71

    分离后原生质层形状

    不规则

    不规则

    近圆形或椭圆形

    A.该实验需要在高倍镜下观察质壁分离现象

    B.细胞颜色不同是由于液泡中色素的差异所致

    C.结果表明，紫色大蒜鳞叶是观察质壁分离的理想材料

    D.若实验前分别用纤维素酶处理各组材料，不会影响实验结果

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    【题目】多酶片是一种复方制剂，它主要是由胰酶、胃蛋白酶复合而成的一种药物，其说明书的部分内容如下。

    （性 状）本品为肠溶衣与糖衣的双层包衣片，内层为胰酶，外层为胃蛋白酶。

    （适应症）用于消化不良、食欲缺乏。

    （用法用量）口服。一次2-3片，一日3次

    （注意事项）本品在酸性条件下易破坏，故服用时切勿嚼碎。

    回答下列问题。

    (1)酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物，具有_______等特点。由于胰酶和胃蛋白酶_______________，故可以加工成多酶片保存，方便患者使用。服用多酶片时不能嚼碎的原因是____________。

    (2)多酶片为肠溶衣与糖衣双层包被，外层包被应为________(选填“肠溶衣”或“糖衣”)。糖衣以糖浆为主要包衣材料，有一定的防潮、隔绝空气、掩盖药物不良气味等作用；肠溶衣为一层特殊包裹物质，能很好保护胰酶不会在胃部被破坏的原因是_________。

    (3)请利用提供的材料用具，设计实验探究pH对胃蛋白酶活性的影响。

    备选材料用具：蛋白块若干，胃蛋白酶溶液，蒸馏水，一系列pH梯度的溶液，试管若干，恒温水浴锅。时钟等。

    实验步骤：

    ①取规格相同的5支洁净试管，分别编号l、2、3、4、5；

    ②___________________；

    ③将试管置于37℃的恒温水浴锅中保温5min；

    ④向5支试管中各加人等量且适量的蛋白块；

    ⑤_____________。

    (4)为进一步确认上述实验中，蛋白块的消失是否是胃蛋白酶催化所致，请提出实验改进的思路_____________。

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】下列说法中，与生物膜发现史不一致的是

    A.欧文顿在实验基础上提出，膜是由脂质组成的

    B.荷兰科学家用丙酮从人的红细胞中提取脂质，在空气—水界面上铺展成单分子层，测得单分子层的面积为红细胞表面积的2倍。他们由此推出：细胞膜中的脂质分子必然排列为连续的两层

    C.罗伯特森在电镜下看到了细胞膜清晰的暗—亮—暗的三层结构，提出所有的生物膜都是由磷脂—蛋白质—磷脂三层结构构成的

    D.科学家用不同荧光染料标记人细胞和鼠细胞并进行融合，证明了细胞膜中的蛋白质是可以流动的

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】科学工作者通过基因工程创造出了“蜘蛛羊，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域。请回答:

    （1）为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因需要从_____(填“基因组”或“cDNA ”)文库中获取，并与_____等调控组件重组在一起，然后与载体相连构建成表达载体；再通过_________方法，将表达载体导入羊的_____，获得重组细胞。

    （2）将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过_____________处理的受体母羊子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加_________。若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”，可将胚胎发育到_____期进行_____处理。

    （3）若所得到的“蜘蛛羊”(已知表达载体已进入细胞)乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，科学家为判断问题所在，应该采用_____技术来检测。

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】以下能证明植物细胞具有全能性的生产实践是

    A.从一粒菜豆种子长成一棵植株B.用植物激素培育无子果实

    C.用一小片土豆叶片，培养成一株完整的植株D.杂交育种

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