精英家教网 > 高中生物 > 题目详情

阅读下列实验原理,分析、设计有关问题:

实验原理:

①核酸在较为剧烈的化学、物理和酶的因素的影响下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶的抑制剂柠檬酸钠,以除去Mg离子,防止DNA酶的激活。

②核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白的形式存在,DNA核蛋白在1 mol/L NaCl溶液中溶解度很大,但在0.14 mol/L NaCl溶液中的溶解度很低;而RNA核蛋白溶于0.14 mol NaCl溶液。

③用苯酚处理,可使蛋白质变性,且留在苯酚层内;在DNA溶液中加入25倍体积为95%的酒精,可将DNA分离出来。此时DNA十分粘稠,可用玻璃棒搅成团取出。

④DNA在强酸环境下,水解产生脱氧核糖等小分子物质,它与二苯胺酸性溶液反应,能生成蓝色化合物。

提供的试剂与器材:

柠檬酸钠溶液、石英砂、0.14 mol/L NaCl溶液、1 mol/L NaCl溶液、苯酚、95%酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。

思考与设计:

(1)分程序设计具体的操作步骤,提取新鲜花椰菜细胞中的DNA。

(2)设计实验证明提取物确实为DNA。

答案:
解析:

(1)①研磨;取10克花椰菜加适量的1mol/L NaCl溶液和少量的柠檬酸钠,研磨成匀浆;②过滤;③向滤液中加入1mol/L NaCl溶液,并搅拌,再缓缓加入蒸馏水,将滤液稀释约6倍,随着NaCl溶液浓度的下降,DNA溶解度逐渐降低,出现丝状物,静止沉淀(最好是进行离心处理);④取沉淀物,置于2 mL 1 mol/L NaCl溶液中,使DNA核蛋白再次溶解,再加2 mL苯酚充分振荡后静止,待其分层后弃其上层的苯酚,蛋白质即被除去;⑤向④步骤留下的下层DNA溶液中加2.5倍体积的97%酒精,此时用玻璃棒搅成团取出,在玻璃棒上的成团物质即是DNA。;

(2)用适量的浓硫酸处理提取的DNA,再滴加二苯胺溶液数滴,用沸水加热,如有蓝色物质出现即可证明提取物是DNA。

导解:本题实为具体考查“DNA的粗提取与鉴定”的实验内容,同时考查语言表达等能力。


练习册系列答案
相关习题

同步练习册答案