Question

（11分）我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答。

（1）铁结合蛋白基因来自菜豆，可通过 扩增获取，如果该基因脱氧核苷酸序列已知且比较小，还可用 方法直接人工合成。

（2）构建重组Ti质粒时，通常先要用 分别切割 。将重组Ti质粒导入农杆菌时，可以用 处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。

（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得 ；培养基3与培养基2的区别是 。检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因稻米 。

（4）为研究外源基因的遗传方式，将T0代植株上收获的种子种植成T1代株系，检测各单株的潮霉素抗性。在检测的多数T1代株系内，抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为3∶1，此结果说明外源基因的遗传符合 。有少数T1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是 。

Answer 1

（11分）PCR 化学（2）（同种）限制酶 含目的基因的DNA片段和质粒 Ca2+（氯化钙）

（3）含有重组质粒的愈伤组织 生长素和细胞分裂素的浓度比例（植物激素比例） 铁的含量 （4）（基因的）分离定律 潮霉素基因没有表达（2分）

【解析】

试题分析：（1）通过PCR技术扩增目的基因；如果该基因脱氧核苷酸序列已知且比较小，还可用化学方法直接人工合成。

（2）构建重组Ti质粒时，通常先要用限制性核酸内切酶分别切割含目的基因的DNA片段和质粒。将重组Ti质粒导入农杆菌时，可以用Ca2+（氯化钙）处理农杆菌，增大细胞壁的通透性，便于使重组Ti质粒导入。

（3）含有重组Ti质粒的农杆菌能够侵染水稻愈伤组织形成重组细胞，培养基2是诱导脱分化的，培养基3是诱导再分化的，区别在生长素和细胞分裂素的浓度比例不同；目的是获得含Fe较高的水稻，所以检测铁的含量。

（4）抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为3∶1，说明出现了性状分离，符合基因的分离定律；能检测到基因，但是没有相应的性状，说明基因没有表达。

考点：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论能力。

考点分析： 考点1：基因工程、生物技术的安全性和伦理问题 试题属性

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