Question

【题目】反义寡脱氧核苷酸技术阻断喉癌Hep-2细胞GLUT-1的表达，能抑制喉癌细胞的葡萄糖吸收。

（1）GLUT-1的加工与抗体类似，按顺序写出与GLUT-1合成加工直接相关的细胞器___________。推测喉癌细胞吸收葡萄糖时，GLUT-1的功能是_________。

（2）反义寡脱氧核苷酸序列能够与GLUT-1基因的mRNA结合，使mRNA不能与______________结合，抑制GLUT-1基因翻译过程。反义寡脱氧核苷酸序列不能与其它正常基因的序列相同，原因是___________________。

（3）某人从癌细胞的_____________文库中获取GLUT-1基因（有内含子）。要获得大量GLUT-1用于研究，将GLUT-1基因导入大肠杆菌中，大肠杆菌等原核细胞具有_______________________（至少写两点）等优点。

（4）利用PCR技术扩增GLUT-1基因，需要_______（填：“1种”、“2种”或“多种”）引物，需要_______（填：“1个”、“2个”或“多个”）个引物。

Answer 1

【答案】核糖体、内质网、高尔基体 运输葡萄糖 核糖体 防止影响正常基因的表达 基因组文库 繁殖快、易培养、遗传物质少 2 多个

【解析】

反义寡脱氧核苷酸序列能够与GLUT-1基因的mRNA结合，使mRNA不能与核糖体结合，影响翻译过程，进而影响基因的表达。cDNA文库属于部分基因文库，小于基因组文库。

（1）GLUT-1的加工与抗体类似，而抗体属于分泌蛋白，在附着在内质网上的核糖体中合成，由内质网初步加工并运输到高尔基体，高尔基体对其进一步加工和包装，通过分泌小泡将其送到细胞膜处，通过胞吐出细胞，故与GLUT-1合成加工直接相关的细胞器核糖体、内质网、高尔基体。根据“反义寡脱氧核苷酸技术阻断喉癌Hep-2细胞GLUT-1的表达，能抑制喉癌细胞的葡萄糖吸收”，可推测GLUT-1可能是运输葡萄糖的载体蛋白，功能为运输作用。

（2）反义寡脱氧核苷酸序列能够与GLUT-1基因的mRNA结合，使mRNA不能与核糖体结合，抑制GLUT-1基因翻译过程。反义寡脱氧核苷酸序列不能与其它正常基因的序列相同，这样可防止影响正常基因的表达。

（3）基因组文库含有启动子，以mRNA为模板逆转录形成的cDNA中既没有启动子，又无终止子和内含子，故获取GLUT-1基因（有内含子）应从基因组文库中获取。大肠杆菌具有繁殖快、易培养、遗传物质少等优点，常用做基因工程中的受体细胞。

（4）由于DNA复制为半保留复制，而引物为单链DNA片段，所以由原来的母链为模板合成的两个新DNA分子中，故利用PCR技术扩增GLUT-1基因时一般需要两种引物，由于每次复制均需要引物，故需要多个引物。