分析 基因工程的操作步骤为
第一步:目的基因的获取
(1)目的基因是指:编码蛋白质的结构基因.
(2)原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成.人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法.
(3)PCR技术扩增目的基因
第二步:基因表达载体的构建
(1)目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用.
(2)组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因
第三步:将目的基因导入受体细胞
(1)转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程.
(2)常用的转化方法:
将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是农杆菌转化法,其次还有基因枪法和花粉管通道法等.
将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是显微注射技术.此方法的受体细胞多是受精卵.
将目的基因导入微生物细胞:Ca2+转化法.
(3)重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达.
第四步:目的基因的检测和表达
(1)首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交技术.
(2)其次还要检测目的基因是否转录出mRNA,方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交.
(3)最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原--抗体杂交.
(4)有时还需进行个体生物学水平的鉴定.如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状.
解答 解:(1)目的基因的获取可采取直接分离获得也可采用人工合成方法,人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法.
(2)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建;提取目的基因需限制酶,将目的基因与运载体结合需DNA连接酶,故①过程需要的酶有限制酶和DNA连接酶.
(3)基因表达载体包含:目的基因+启动子+终止子+标记基因.
(4)农杆菌转化法利用的是农杆菌的转化作用,将目的基因整合到受体细胞的染色体DNA上,进而使目的基因能够稳定遗传和表达.检测目的基因是否转录出mRNA,方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原--抗体杂交.
(5)将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法,检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交技术.
(6)科学家在培养转基因植物时,常用原核生物中的质粒做运载体.质粒是基因工程最常用的运载体,它具备运载体条件:①能够在宿主细胞中自我复制;②至少一个酶切位点,便于外源基因连接;③具有某些标记基因,便于目的基因的鉴定与筛选.
故选答案为:
(1)直接分离获得 人工合成方法
(2)基因表达载体的构建 限制酶 DNA连接酶
(3)标记基因
(4)染色体的DNA 转化作用 抗原-抗体杂交
(5)农杆菌转化法
(6)复制 酶切位点 标记基因
点评 本题考查了基因工程的有关知识,要求考生能够掌握基因工程的操作工具、操作步骤以及相应的生理基础等;识记质粒能够作为运载体的条件等,难度适中,属于考纲中识记、理解层次的考查.
科目:高中生物 来源:2015-2016学年辽宁省高二实验班上第二次月考生物试卷(解析版) 题型:选择题
(2015春•开福区校级期末)决定反射时间长短的主要因素是( )
A.刺激强度的大小 B.感受器的兴奋性
C.中枢突触数目的多少 D.效应器的兴奋性
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 唾液淀粉酶可催化淀粉形成葡萄糖 | |
B. | RNA聚合酶能催化转录过程,也能使DNA中的氢键断裂 | |
C. | 一种限制酶能识别多种核苷酸序列,切割出多种目的基因 | |
D. | 胃蛋白酶能使蛋白质变成氨基酸 |
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科目:高中生物 来源: 题型:填空题
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 该病是伴X隐性遗传病 | B. | III2携带该致病基因的概率为$\frac{1}{4}$ | ||
C. | III3的基因型可能是XEXeD | D. | 测定G-6-PD可初步诊断是否患该病 |
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 甲图中生物自交后产生基因型为Aadd的个体的概率为$\frac{1}{8}$ | |
B. | 乙图细胞处于有丝分裂后期,该生物正常体细胞的染色体数为4条 | |
C. | 丙图所示家系中男性患者明显多于女性患者,该病最有可能是伴X隐性遗传病 | |
D. | 丁图表示雄果蝇染色体组成图 |
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 0 | B. | $\frac{1}{8}$ | C. | $\frac{1}{16}$ | D. | $\frac{1}{4}$ |
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 该血球计数板上有2个计数室,玻片厚度为0.1mm | |
B. | 制片时,先用吸管滴加样液,再盖盖玻片 | |
C. | 该方格中酵母菌的数量应计为9个 | |
D. | 实验中被台盼蓝溶液染成蓝色的酵母菌为死细胞 |
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