Question

白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将白细胞介素的基因导入到酵母细胞中，使其分泌出有活性的人白细胞介素。

（1）目的基因获取和扩增：

①从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞，于37℃培养48h，提取细胞总RNA，经???????????? 作用生成cDNA。

②根据已知目的基因的核苷酸序列，合成引物、通过PCR扩增获取目的基因，此时需要加入的反应物与生成cDNA时所加反应物不同的是????? （至少写出两种）。

（2）重组载体的构建：由图中可知：酶切载体和目的基因用的是___________酶，经DNA连接酶处理，形成重组载体。重组载体的化学本质是????????????

（3）将重组载体导入酵母细胞，在培养液中培养一段时间后，利用纯化的产物进行细胞培养实验，可研究人的白细胞介素对于???????????? 的作用。

 

Answer 1

【答案】

（1）反转录?? 模板cDNA?? 热稳定DNA聚合酶?? 引物

（2）两种限制酶EcoRⅠ与EcoR52??? DNA

（3）促进淋巴细胞增殖（抑制肿瘤细胞增殖）

【解析】

试题分析：（1）以RNA为模板合成DNA需要题干逆转录（反转录）。PCR扩增获取目的基因时需要模板cDNA、热稳定DNA聚合酶、引物、原料。（2）由图示可知载体和目的基因都有限制酶EcoRⅠ与EcoR52的识别位点和切割位点，所以酶切载体和目的基因用的是两种限制酶EcoRⅠ与EcoR52，重组载体实际上是重组DNA,因而其化学本质是DNA。（3）白细胞介素可治疗癌症，因此可推知白细胞介素可抑制肿瘤细胞的增殖。

考点：本题考查基因工程及基因工程的应用，意在考查识图能力、推理分析能力及识记能力。