[题目]淀粉酶在食品加工及轻工业生产中具有广泛用途.研究人员从细菌中克隆了一种淀粉酶基因.为获得高产淀粉酶菌株.按下图所示流程进行基因工程操作.(1)将淀粉酶基因与质粒载体重组时需要使用的酶包括 . .(2)大肠杆菌经过Ca2+加处理后.细胞处于一种能吸收环境中DNA分子的生理状态.这种细胞称为细胞.将其与溶于缓冲液中的重� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】淀粉酶在食品加工及轻工业生产中具有广泛用途。研究人员从细菌中克隆了一种淀粉酶基因，为获得高产淀粉酶菌株，按下图所示流程进行基因工程操作。

（1）将淀粉酶基因与质粒载体重组时需要使用的酶包括____、____。

（2）大肠杆菌经过Ca2+加处理后，细胞处于一种能吸收环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为____细胞。将其与溶于缓冲液中的重组表达载体DNA分子混合，在适宜的温度下完成 _______过程。

（3）为了初步筛选高产菌株，研究人员将得到的3个工程菌株接种到以淀粉为唯一碳源的培养基上，经过培养后用稀碘液处理，可观察到由于淀粉被分解，在平板上形成以菌落为中心的透明圈。测量不同菌株形成的菌落及透明圈直径，结果见下表。

工程菌	菌落直径（C， mm）	透明圈直径（H， mm）	H/C
菌株I	8.1	13.0	1.6
菌株Ⅱ	5.1	11.2	2.2
菌株III	9.5	17.1	1.8

①表中菌落直径（C）的大小反映了____，透明圈直径（H）的大小反映了____。

②根据表中数据，可推断其中淀粉酶产量最高的菌株是____。

（4）基因工程技术己成功应用于人类生产生活中的诸多方面。请从植物育种方面举一实例，并说明制备该转基因产品的基本技术流程。____:____________。

【答案】限制酶（限制性核酸内切酶） DNA连接酶感受态转化细菌的增殖速度细菌分解淀粉的能力菌株II 转基因抗虫棉花；从苏云金芽饱杆菌中克隆Bt毒蛋白基因，构建重组载体，导入棉花细胞后进行组织培养，经对再生植株中目的基因的检测，获得转基因抗虫棉花

【解析】

基因工程的四个基本操作程序：目的基因的获取→基因表达载体的构建（核心步骤）→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定；基因工程常用的工具：限制酶（限制性核酸内切酶）、DNA连接酶、运载体。

（1）将目的基因（淀粉酶基因）与质粒载体重组时，需要使用同一种限制酶将目的基因与质粒切割出相同的末端，再用DNA连接酶将目的基因与质粒载体连接形成重组载体。

（2）大肠杆菌（微生物）经过Ca2+溶液（氯化钙）处理后能成为感受态细胞，易于吸收环境中的DNA分子；将其与溶于缓冲液中的重组表达载体DNA分子混合，在适宜的温度下完成转化过程。

（3）①菌落直径越大，表明细菌数量越多，细菌增殖越快，因此表格中菌落直径的大小反映了细菌的增殖速度；淀粉被淀粉酶水解，在平板上形成以菌落为中心的透明圈，因此透明圈直径的大小反映了细菌分解淀粉的能力。

②H/C值越大，淀粉酶产量越高，因此菌株Ⅱ淀粉酶产量最高。

（4）题干要求从植物育种方面举一实例，并说明制备该转基因产品的基本技术流程，可以举例转基因抗虫棉花，其基本流程为：从苏云金芽饱杆菌中克隆Bt毒蛋白基因，构建重组载体，导入棉花细胞后进行组织培养，经对再生植株中目的基因的检测，获得转基因抗虫棉花。

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（2）研究者设计图2所示的DNA片段，转人小鼠体内，获得仅含一个图2所示片段的转基因小鼠。

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②研究者用显微注射法将图2所示表达载体导入小鼠的_____中，得到仅含一个图2 所示片段的转基因小鼠，再经过进一步筛选，获得纯合的转基因小鼠a。

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