Question

14．请回答与微生物分离和培养有关的问题：
（1）稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是①②④③（填序号）．为减少误差，在设置平板是一般要3个或以上数目平板；若统计出在稀释倍数为10⁵的平板上的平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为0.2ml，则每克样品中的菌落数为1.5x10⁷个．
①土壤取样
②称取10g土壤加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液
③吸取0.1ml溶液进行涂布平板
④依次稀释至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶、10⁷稀释度
（2）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染．其中对培养基和培养皿进行灭菌的常用方法分别是高压蒸汽灭菌、干热灭菌；要求实验操作应在酒精灯火焰旁进行，以避免周围环境中微生物的污染．
（3）要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌，而寻找耐热菌要从高温热泉中，这说明寻找目的菌的方法是：到相应生存环境中寻找．

Answer 1

分析 从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．回忆培养微生物的培养基的成分、配制培养基应遵循的原则、常用的微生物接种方法和选择培养基的选择作用，然后结合题干信息进行解答．

解答 解：（1）分离纯化土壤微生物的正确的操作步骤：①土壤取样，②制备土壤溶液，④制备土壤样品稀释液，③涂布平板分离．所以正确的操作顺序是①②④③．为减少偶然误差，在设置平板是一般要3个或以上数目平板；根据公式可知每克样品中的菌落数为：30÷0.2×10⁵=1.5×10⁷个．
（2）微生物培养中，培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌，培养皿等器具可以使用干热灭菌．为避免杂菌污染，接种时需要在酒精灯火焰旁进行．
（3）顺序目的微生物时常需要到相应生存环境中寻找．
故答案为：
（1）①②④③3个     1.5x10⁷个
（2）高压蒸汽灭菌     干热灭菌    酒精灯火焰旁
（3）到相应生存环境中寻找

点评 本题主要考查微生物的培养、筛选与分离，意在强化学生对相关知识的理解与运用，题目难度中等．