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    5．常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母菌，操作如下：
    （1）将自然界中采集的葡萄带回实验室，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后将瓶中的液体用涂布接种于以木糖为唯一碳源的固体培养基上，在适宜的条件下培养一段时间，获得能利用木糖的多个酵母菌菌落．
    （2）若要检测土样中的酵母含量，应采用稀释涂布平板法法、在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格．然后，将1mL土壤溶液稀释分别稀释10倍和100倍，每种稀释度各在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，6个平板上的菌落数分别为59、57、58、2、7和5，据此可得出每升土壤溶液中的活菌数位5.8×106个．
    （3）若要长期保存酵母菌，菌液中常需要加入一定量的甘油（填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”），且要放置在-20℃的冷冻箱中．若要短期保存酵母菌，可将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，菌落长成后，将试管放置在4℃的冰箱中保藏．

    分析 1、选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的．利用选择培养基和转基因技术能够筛选利用葡萄糖和木糖产生酒精，且对酒精的耐受能力强的酵母菌．
    2、菌种的保存：

     临时保存法甘油管藏法
    适用对象频繁使用的菌种长期保存的菌种
    培养及类型固体斜面培养基液体培养基
    温度4℃-20℃
    方法菌落长成后于冰箱中保存，每3～6个月将菌种从旧的培养基转移到新鲜培养基上将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后于冷冻箱内保存
    缺点菌种易被污染或产生变异\\

    解答 解：（1）根据题意可知，“自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母菌”，因此筛选这种酵母菌需要以木糖为唯一碳源，在适宜的条件下培养一段时间，获得能利用木糖的多个酵母菌菌落．
    （2）若要检测土样中的酵母菌含量，应采用稀释涂布平板法．在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，用于检测培养基平板灭菌是否合格．稀释涂布平板法中，一般选用30～300个菌落数进行计数，因此采用稀释10倍和菌落数分别为59、57、58的进行计算，据此可得出每升土壤溶液中的活菌数为=（59+57+58）÷3×10÷（0.1×10-3）=5.8×106个．
    （3）若要长期保存酵母菌，菌液中常需要加入一定量的甘油，且要放置在-20℃的冷冻箱中．若要短期保存酵母菌，可将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，菌落长成后，将试管放置在4℃的冰箱中保藏．
    故答案为：
    （1）碳源    菌落
    （2）稀释涂布平板法     检测培养基平板灭菌是否合格     5.8×106
    （3）甘油-20     4

    点评 本题考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生掌握微生物选择的方法以及培养基的制备，掌握菌种保存的方法等，属于考纲中识记、理解层次的考查．

    练习册系列答案
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    生长素溶液的浓度 （mol．L-1）10-1310-1210-1110-1010-910-810-710-610-510-4
    2d后的平均长度（mm）胚芽12.312.312.713.514.716.015.112.210.810.0
    胚根11.312.112.713.612.612.010.910.010.010.0
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    （2）为什么要用10条一组而不是1条一组放入生长素溶液中进行实验？减少偶然误差，获得精确的实验结果
    （3）在如图坐标中绘出胚芽及胚根在不同浓度的生长素溶液中的伸长变化曲线．

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