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    2．微载体是由天然葡聚糖等组成的颗粒，常用与贴壁生长的细胞培养，又叫做动物细胞围住培养，与其相关的装置和流程图如下，请回答：

    （1）微载体的直径很小，其培养原理是将对细胞无害的颗粒-微载体加入到培养液中，细胞在其表面附着（固着）/贴壁生长，而且操作中需要通过搅动使微载体始终保持悬浮状态，而让细胞与培养液充分接触，这样细胞就可以在载体表面繁殖成单层（“单层”、“多层”）
    （2）培养罐中培养细胞时，要注意保持适宜的温度和pH，还需要提供细胞所需的营养、气体环境等．为维持培养液的pH，应在培养液中加入95%空气和5%CO2的混合气体．图3是某科研小组培养的细胞，由于培养用具灭菌不严格，结果出现曲线2的情况，为了避免这种情况通常可以在培养液中加入抗生素，其作用是防止培养过程中的污染（防止杂菌污染）．
    （3）在生产单克隆抗体的过程中，杂交瘤细胞在加入培养罐前，需筛选出符合条件的细胞群，还要对选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测方能加入培养罐培养．
    （4）科研人员利用明胶微载体培养出了胚胎干细胞，并在培养液中加入分化诱导因子，成功构建了骨组织．
    （5）在试管动物的培育中，涉及的关键技术是体外受精和早期胚胎的培养，再将一些胚胎进行移植，就可以实现良种动物的大量繁殖．移植中要求受体母牛要具有健康的体质和正常繁殖的能力．

    分析 1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．
    2、动物细胞培养需要满足以下条件
    ①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理．通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染．此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害．
    ②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等．通常需加入血清、血浆等天然成分．
    ③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4．
    ④气体环境：95%空气+5%CO2．O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH．
    3、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞．利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．两次抗体检测：专一抗体检验阳性，获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞．最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体．
    4、试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植产生后代的技术．

    解答 解：（1）在动物细胞培养过程中，细胞会出现贴壁细胞生长现象；到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，会出现细胞的接触抑制现象．将对细胞无害的颗粒-微载体加入到培养液中，细胞会附着在颗粒-微载体上生长，而且操作中需要通过搅动使微载体始终保持悬浮状态，而让细胞与培养液充分接触，这样细胞就可以在载体表面繁殖成单层．
    （2）在培养液中添加一定量的抗生素，能防止培养过程中的污染；气体环境主要是提供细胞所需的O2和CO2，其中CO2的作用是维持培养液的pH．
    （3）细胞融合是随机的过程，所以需要用选择培养基培养基筛选，目的是选择出杂交瘤细胞．对筛选出的细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可产生特定抗体的杂交瘤细胞．
    （4）在ES细胞培养液中加入特定的促进分化的因子可以体外诱导定向形成骨组织．
    （5）试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植产生后代的技术．胚胎移植中要求受体母牛要具有健康的体质和正常繁殖的能力．
    故答案为：
    （1）附着（固着）/贴壁       单层
    （2）5%CO2                    防止培养过程中的污染（防止杂菌污染）
    （3）抗体检测          
    （4）分化诱导
    （5）早期胚胎          正常繁殖

    点评 本题综合考查细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记单克隆抗体制备的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记动物细胞培养的具体过程；识记胚胎移植的基本程序，能结合所学的知识准确答题．

    练习册系列答案
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    C可遗传变异的来源基因重组突变基因突变染色体变异
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