Question

10．利用细胞工程技术制备抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体，其主要流程如下：

回答下列问题：
（1）制备抗HCG单克隆抗体过程中，用到的动物细胞工程技术有动物细胞融合和动物细胞培养．
（2）细胞DNA合成有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断．在HAT培养中加入了氨基嘌呤，杂交瘤细胞能连续增殖，未融合细胞以及同种融合细胞因不能增殖而死亡．由此可判断骨髓瘤细胞DNA合成存在S（填“D”、“S”或“D和S”）途径．
（3）步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养及抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行．先将细胞悬浮液稀释到7-10个细胞/ml，再在每个培养孔中滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的．
（4）用抗HCG单克隆抗体作出诊断试剂，能在妊娠初期即可作出诊断，主要是因为该抗体具有特异性强、灵敏度高的优点．

Answer 1

分析 1、单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体．诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）．
2、单克隆抗体的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．两次抗体检测：专一抗体检验阳性．

解答 解：（1）制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养B淋巴细胞、骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞，动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞．
（2）加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖．
（3）步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养及抗体检测，为了使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的，一般在多孔细胞培养板上进行．先将细胞悬浮液稀释到7-10个细胞/ml，再在每个培养孔中滴入0.1ml细胞稀释液．
（4）单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的优点．
故答案为：
（1）动物细胞融合       动物细胞培养 
（2）S
（3）使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的
（4）特异性强、灵敏度高

点评 本题结合图解，考查单克隆抗体的制备过程，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查．