因为猪的基因和人类的基因存在一定相似度.据报道经过特殊处理的猪皮可在人身上存活3周左右.起到保护创面免受感染的作用.为了使移植的猪皮存活时间更长.有人设法导入人的相关基因(用P表示).获得转基因小白猪.其简单流程如图所示:(1)过程①中形成重组DNA常用的酶有 ,将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是 .(2)过程②中.常用酶处� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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因为猪的基因和人类的基因存在一定相似度。据报道经过特殊处理的猪皮可在人身上存活3周左右，起到保护创面免受感染的作用。为了使移植的猪皮存活时间更长，有人设法导入人的相关基因(用P表示)，获得转基因小白猪。其简单流程如图所示：

(1)过程①中形成重组DNA常用的酶有____________；将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是__________。

(2)过程②中，常用________酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒的环境、________、温度和pH、________。

(3)过程③中所用的胚胎工程技术是______________，然后将早期胚胎移入另一头与供体__________但未经配种的代孕母猪的相应部位。

(4)图中的卵母细胞应在体外培养到__________期。

(1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶　显微注射法

(2)胰蛋白(或胶原蛋白)　营养　气体环境(或通气环境)

(3)早期胚胎培养　同期发情(或同时发情)　(4)减数第二次分裂中

【解析】实际上，基因工程仅仅创造出工程细胞，若要转化为产品，需要实施细胞工程或胚胎工程。过程③是将重组细胞培育为可移植的早期胚胎的过程，为确保移植成功，需保证代孕母猪的子宫内生理状态与供卵母体的生理状态一致。

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DNA粗提取：

第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15 mL研磨液，充分研磨，用两层纱布过滤，取滤液备用。

第二步：先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液，再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。

第三步：取6只试管，分别加入等量的2 mol/L的NaCl溶液溶解上述絮状物。

DNA检测：在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。

材料保存温度	花菜	辣椒	蒜黄
20 ℃	＋＋	＋	＋＋＋
－20 ℃	＋＋＋	＋＋	＋＋＋＋

注：“＋”越多表示蓝色越深。

分析上述实验过程，回答下列问题。

(1)该探究性实验的课题名称是_________________________________。

(2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少_______________________。

(3)根据实验结果，得出结论并分析。

①结论1：与20 ℃相比，相同实验材料在－20 ℃条件下保存，DNA的提取量较多。

结论2：______________________________________________。

②针对结论1，请给出合理的解释：_______________________________________________________________

______________________________________________________________。

(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是_______________________________，

然后用体积分数为95%的冷酒精使DNA析出。

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