[题目]下图1为生产HIV单克隆抗体的过程.图2为运用基因工程技术生产HIV疫苗的操作简要路径. 据图分析回答.(1)图1中, 过程①称为技术.通过过程②获得的杂交瘤细胞还需要进行 .以便获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞.(2)图2中, 过程①需要用到酶.一个DNA片段进行扩增最简便的方法是使用PCR技术.如果这个过程中� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】下图1为生产HIV单克隆抗体的过程，图2为运用基因工程技术生产HIV疫苗的操作简要路径。据图分析回答。

（1）图1中, 过程①称为_____________技术，通过过程②获得的杂交瘤细胞还需要进行 ___________________ ，以便获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

（2）图2中, 过程①需要用到________酶。一个DNA片段进行扩增最简便的方法是使用PCR技术，如果这个过程中消耗了引物62个，则共进行了______轮的DNA复制。

（3）图2所示的运用基因工程技术生产的HIV疫苗还不能有效用于艾滋病预防，原因是________________________________________。

（4）用限制酶处理DNA片段，可使特定核苷酸序列特定部位的_____________键断开。若用X、Y两种限制酶作用于图2中的DNA片段，并进行电泳分析，其结果如下图。A至D选项中,关于两种酶切位置的判断, 正确的是____。

【答案】（动物)细胞融合克隆化培养和抗体检测逆转录 5 艾滋病病毒为单链RNA病毒，变异频率高磷酸二酯 B

【解析】根据图1中生产HIV单克隆抗体的过程分析，HIV自愈者的免疫细胞和骨髓瘤细胞经过程①的诱导融合得到杂交细胞，再经过程②的筛选（克隆培养和抗体阳性检测），得到既能产生特异性抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞，收集所需的单克隆抗体。图2为运用基因工程技术生产HIV疫苗的操作简要路径，首先提取HIV的RNA片段，经逆转录过程（①），得到DNA片段，再将含疫苗基因的DNA片段插入（②）到质粒中，构建出基因表达载体；然后将含疫苗基因的重组质粒导入（③）到酵母菌细胞内，通过检测和鉴定能产生疫苗的酵母菌，提取HIV疫苗。

（1）根据前面的分析可知，图1中过程①称为动物细胞融合技术和过程②融合实验完成后，经过克隆化培养和抗体阳性检测，以便获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。

（2）根据前面的分析可知，图2中过程①是逆转录过程，需要用到逆转录酶。一个DNA片段进行PCR技术扩增，如果这个过程中共消耗了引物62个，则第一次消耗2个引物；第二次则消耗4个引物，第三次消耗8个引物，以此类推，第四次消耗16个，第五次消耗32个，累计刚好总消耗2+4+8+16+32=62个引物。

（3）通过图2所示的基因工程技术生产的HIV疫苗常常还不能有效用于艾滋病预防，主要原因在于艾滋病病毒是单链RNA病毒，变异频率高。

（4）限制酶作用的化学键是切断特定核苷酸之间的磷酸二酯键。根据电泳结果图分析可知，若只用X一种限制酶作用于图2中的DNA片段，产生3条不同的DNA短片段（6000、3500和500），说明限制酶X对该DNA有两个切点；若只用Y一种限制酶作用于图2中的DNA片段，产生2条不同的DNA短片段（8000、2000），说明限制酶Y对该DNA只有1个切点；而同时用两种限制酶切割该DNA 片段，得到4条不同DNA短片段（4500、3500、1500和500），说明两种限制酶对该DNA的3个切点是不重合的；分析得到的所有不同DNA短片段并与选项结合分析可知，只有B选项符合题意。

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(1)步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是_________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了________和________序列，以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是：Ti质粒内，每种限制酶有________个切割位点，酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列_______(相同/不相同)

(2)步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有________，步骤③中需先用________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

(3)步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过________获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是________________。

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