Question

苦马豆素(SW)因从灰苦马豆中分离出来而得名，被认为是“未来的肿瘤治疗药物”。以下是相关的实验研究过程及结果。

①将等量的小鼠肝癌Hepal－6细胞悬液，分别接种于若干个含有等量培养液的培养瓶中；

②将培养瓶放于37 ℃、5% CO2培养箱中培养24 h，静置、去除上清液；

③分别加入等量但含不同浓度SW的培养液，于37 ℃、5% CO2培养箱中继续培养；

④分别在24 h、48 h、72 h时吸取培养液，观察结果，得到不同浓度SW对细胞存活率影响曲线如图所示。

请回答下列问题。

(1)培养箱中5% CO2的作用是______________________________________。

(2)处于间期的肝癌Hepal－6细胞，其分子水平的主要变化是________________________________________________________________。

(3)步骤③中需要设置对照组，对照组的处理方法应为________。步骤③中每个实验组设置5个培养瓶同时进行培养，计数后统计平均值，这是为了________________，使实验结果更准确。

(4)分析图中曲线可知，SW对肝癌Hepal－6细胞作用效果的特点是①______________________________________________________________；

②__________________________________________________________。

(5)将培养48 h的培养液离心，去除上清液后经过一系列的处理及分析，得到培养48 h细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl－2的表达量如表所示：

SW	癌细胞数目	凋亡细胞数目	Bax蛋白	Bcl－2蛋白
2/(μg·mL－1)	＋	＋＋＋	＋＋＋＋＋	＋
1/(μg·mL－1)	＋＋	＋＋＋	＋＋＋	＋＋
0.5/(μg·mL－1)	＋＋＋	＋＋	＋＋	＋＋＋
0/(μg·mL－1)	＋＋＋＋	＋	＋	＋＋＋＋

注：“＋”的数量表示相对值的多少

据此推测，SW可能是通过诱发癌细胞________来抑制肿瘤生长的，其原因可能是SW促进了癌细胞内________________的表达。

 

Answer 1

【答案】

(1)维持培养液的pH

(2)DNA复制和有关蛋白质的合成

(3)加入等量不含SW的培养液(或只加等量培养液)　减小误差

(4)①SW浓度越高，对细胞生长(存活)的抑制作用越强　②SW作用时间越长，对细胞生长(存活)的抑制作用越强

(5)凋亡　Bax蛋白基因

【解析】(1)培养箱中5% CO2的作用是维持培养液的pH。

(2)肝癌细胞在分裂间期主要进行DNA的复制和有关蛋白质的合成。

(3)该实验中对照组应加入等量不含SW的培养液。每个实验组设置5个培养瓶同时进行培养，计数后统计平均值的目的是减小误差。

(5)由表格中的数据可以推测，SW可能是通过诱发癌细胞凋亡来抑制肿瘤生长的，其原因可能是SW促进了癌细胞内Bax蛋白(凋亡蛋白)基因的表达。