Question

【题目】基因工程技术包括一系列的分子生物学操作步骤。请回答下列问题：

（1）基因工程操作的核心步骤是____________________。

（2）限制酶、DNA连接酶和___________是基因工程的基本操作工具。其中限制酶的特点是_______________。

（3）Mullis教授因发明PCR技术获1993年诺贝尔奖，PCR技术中需要的酶是_________________，若PCR进行20轮循环，理论上可获得个____________基因片段。

（4）将目的基因导入动物受体细胞的方法是_______________。

（5）周光宇教授提出的花粉管通道法为我国的转基因抗虫棉作出重要贡献，请写出分子水平检测抗虫棉基因是否表达的方法__________________。

Answer 1

【答案】 构建基因表达载体 运载体 能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，在特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（或在特定的部位断开） 热稳定DNA聚合酶（Taq酶) 220 显微注射法 抗原﹣抗体杂交技术

【解析】试题分析：梳理DNA重组技术的基本工具、基因工程的基本操作程序的相关知识，并结合题意进行相关试题的解答。

(1) 基因工程操作的核心步骤是构建基因表达载体 。

(2) 限制酶、DNA连接酶和运载体是基因工程的基本操作工具。限制酶的特点是：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，在特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（或在特定的部位断开）。

(3) PCR技术中需要热稳定DNA聚合酶（Taq酶)。PCR技术的原理是双链DNA 复制的原理，因此PCR进行20轮循环，理论上可获得220个基因片段。

(4) 将目的基因导入动物受体细胞的方法是显微注射法。

(5) 在分子水平上，检测抗虫基因（目的基因）是否表达，可采用抗原﹣抗体杂交技术。