Question

（14分）绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶是                 。③过程需要的酶是             。

（2）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可采用               技术进行检测。

（3）用显微镜可观察到用于⑥过程的猪卵母细胞的卵黄膜和透明带之间有         个极体。用于⑤过程的猪胎儿成纤维细胞，一般选用传代10代以内的细胞，原因是                                     。

（4）由⑦过程获得的重组细胞培育成绿色荧光转基因克隆猪，涉及到的现代生物技术手段有                                              。

（5）为了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。得到绿色荧光转基因克隆猪（雌性）之后，可用                       处理，使之超数排卵，提高其繁育能力。

 

Answer 1

【答案】

（14分，每空2分）(1)HindⅢ和PstⅠ    DNA连接酶     

（2）DNA分子杂交  （3）1   10代以内的细胞保持正常的二倍体核型   

（4）早期胚胎培养和胚胎移植（缺一不得分）   （5）促性腺激素

【解析】从图示可知，运载体是用HindⅢ和PstⅠ切割，所以目的基因也必须使用相同的限制酶切割，具有相同的粘性末端，用DNA连接酶把目的基因和运载体相连，目的基因是否导入通常利用DNA杂交技术来获得，没有完成受精作用的次级卵母细胞有一个极体，一般用于核移植的细胞的细胞核通常选用传代10代以内的细胞，是因为10代以内的细胞保持正常的二倍体核型，动物基因工程通常是导入受精卵中的在体外涉及动物细胞的培养成早期胚胎，再通过胚胎移植到母体内发育，利用促性腺激素对受体和供体通常采用同期发情处理，使之超数排卵，提高其繁育能力便于移植成功。