Question

20．空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降．某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况．实验步骤如下：
①配置培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H₂O）；
②制作无菌平板；
③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；
④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数．
回答下列问题：
（1）该培养基中微生物所需的氮来源于牛肉膏和蛋白胨．若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是琼脂．
（2）步骤③中，实验组的操作是将各实验组平板放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间．
（3）若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了污染现象．若将30（即36-6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法不正确（填“正确”或“不正确”）．

Answer 1

分析 统计菌落数目的方法
（1）显微镜直接计数法
 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌．
（2）间接计数法（活菌计数法）
 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌．
②操作
a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性．
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数．

解答 解：（1）牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白质的水解产物，都可以作为氮源；平板为固体培养基，故需要加入琼脂． （2）实验探究的是教室内不同高度空气中微生物的分布，其中变量为不同高度，故需在不同高度下放置开盖平板．同时，为了保证单一变量，需要保证开盖放置时间一致；为了保证实验可靠，需要设置多个平行实验．
（3）在完全正确的操作情况下，空白对照组中不应出现菌落．若出现菌落，说明操作过程中存在微生物污染，属于实验失误，所有实验数据均不应采用．
故答案为：（1）牛肉膏和蛋白胨  琼脂
（2）将各实验组平板放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间 
（3）（微生物）污染   不正确

点评 本题主要考查微生物的数量测定，意在考查考生对相关知识的理解，把握知识间内在联系的能力．