Question

【题目】淀粉酶在工业生产上应用最早，迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂产品之一。为了提高淀粉酶的生产水平，首先要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株。某研究人员对所取土样进行产淀粉酶的细菌的分离操作(A组)和计数操作(B组)，过程如图Ⅰ。请回答下列问题：

(1)步骤①取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要___(填操作)，步骤④所用培养基的碳源是___；步骤⑤所用固体培养基的制备步骤是计算→____→溶化→灭菌→倒平板；步骤⑤⑧接种时需设置未接种培养基做对照，目的是_______。

(2)步骤⑥挑选出的菌落若要频繁使用，可以采用临时保藏的方法，该方法的缺点是________。

(3)步骤⑦中，将1mL菌液分别稀释10倍和100倍，每种稀释度经过步骤⑧各在3个平板上接种(每个平板的接种量为0.1mL)，经适当培养后，2组平板上的菌落数分别为59、57、58和2、7、5。据此可得出每升菌液中的活菌数为____个。

(4)图Ⅱ所用的接种方法____(填“能”或“不能”)对活菌进行计数；甲、乙、丙为划线的三个区域，为正确完成整个接种过程，接种环至少进行____次灼烧灭菌。

Answer 1

【答案】灭菌 淀粉 称量 检测培养基是否被污染 保存时间不长，菌种容易被污染或产生变异 5.8×106 不能 4

【解析】

取样用的金属用具可采用干热灭菌法进行灭菌，防止杂菌污染；固体培养基的制备步骤是计算→称量→溶化→灭菌→倒平板；对活菌进行计数常用稀释涂布法。

(1) 步骤①取土样用的小铁铲和盛土样的信封等使用工具在使用前都需要灭菌；步骤④所用培养基是选择培养基，用淀粉为唯一碳源；步骤⑤所用固体培养基的制备步骤是计算→称量→溶化→灭菌→倒平板；步骤⑤⑧接种时需设置未接种培养基做对照，目的是检测培养基是否被污染。

(2)步骤⑥挑选出的菌落若要频繁使用，可以采用临时保藏的方法，但该方法存在保存时间不长，菌种容易被污染或产生变异的缺点。

（3）步骤⑦的稀释液为100倍时形成的菌落平均数为58，在30~300之间，适于进行分离、计数。据此可得出每升菌液中的活菌数为5.8×106个。

（4）图Ⅱ所用的接种方法为平板划线法，常用稀释涂布法对活菌进行计数。甲、乙、丙为划线的三个区域，为正确完成整个接种过程，接种环至少进行4次灼烧灭菌。