Question

CTAB法是一种从高等真核生物细胞中制备基因组DNA（总DNA）的技术。CTAB能跟核酸形成复合物，在高盐溶液（＞0.7 mol／L的NaCl溶液）中可溶并且稳定存在，当降低溶液中盐的浓度（＜0.3 mol／L的NaCl溶液），CTAB－核酸的复合物就会因溶解度降低而沉淀，再用70％酒精浸泡可洗脱掉CTAB；氯仿能使蛋白质发生变性而沉淀。提取和检测水稻基因组DNA的操作步骤如下：

①在50 ml离心管中加入20 ml　CTAB抽提缓冲液（主要成分是1.4 mol／L的NaCl、2％的CTAB），于65℃水浴中预热；

②将20 g新鲜的水稻幼嫩叶片剪成小段后放于研钵中，用液氮速冻并研磨成粉末，加入上述离心管中，于65℃水浴中保温30 min；

③取出离心管中，冷却至室温，加入20 mL的氯仿，轻轻混匀20 min；

④在室温下以12000 r／min的转速离心10－20 min；

⑤将上清液移入另一个离心管中，加入2／3体积的经冷却的异丙醇，用玻璃棒轻轻搅动，小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB－核酸的复合物沉淀；

⑥将沉淀移入另一个离心管中，加入70％乙醇洗涤，重复洗涤1－2次；

⑦吹干乙醇后，将DNA溶于适量的TE缓冲液中，在0.8％的琼脂糖凝胶上电泳分离并在核酸紫外检测仪上观察。

请回答下列问题：

（1）植物基因组DNA（总DNA）的提取通常采用机械研磨的方法，常温下研磨时，

植物细胞匀浆含有多种酶类对DNA的提取产生不利的影响。用液氮速冻，材料在研磨时易于破碎，同时还具有________________的作用。

（2）实验步骤③、④的目的是________________。

（3）实验步骤⑤中，玻璃棒上出现沉淀的主要原因是________________。

（4）对DNA进行定性检测常用的试剂是________。琼脂糖凝胶电泳是利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及________、________，使带电分子产生________而实现分离。DNA在260 nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰，利用核酸紫外检测仪可以进行________。

Answer 1

答案：
解析：

（1）降低细胞匀浆中酶的活性，避免对DNA的提取产生不利影响（2分） 　　（2）去除溶液中的蛋白质（使蛋白质变性和沉淀） 　　（3）溶液中NaCl的浓度＜0.3 mol／L，CTAB－核酸的复合物因溶解度降低而沉淀 　　（4）二苯胺　分子大小　形状的不同　不同的迁移速度　DNA含量的测定（或检测DNA）