Question

13．请回答与大肠杆菌纯化培养有关的问题：
（1）制备培养基
配制培养基时各种成分在熔化后分装前必须进行调节pH，培养基在接种前要进行高压蒸汽灭菌法灭菌．
（2）纯化大肠杆菌
①通过接种在琼脂固体培养基的表面进行连续划线操作，将聚焦的菌种逐步分散到培养基的表面，在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这种方法称为平板划线法．
②用该方法统计样本菌落数时是（是、否）需要设置对照组？为什么？需要判断培养基是否被污染．
（3）讨论分析
①纯化大肠杆菌时，不可（可/不可）用加入抗生素的方法防止杂菌感染．
②用该方法分享大肠杆菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是线条的末端的细菌数量少，最终可以得到由单个细菌繁殖而形成的菌落．
③大肠杆菌与酵母菌的最本质区别是大肠杆菌无成形的细胞核．

Answer 1

分析 （1）微生物实验室培养的关键就在于防止杂菌污染，故实验室培养时需严格无菌操作，对培养基用高压蒸汽灭菌、培养皿用干热灭菌，接种环用灼烧灭菌，实验者的双手用酒精擦拭消毒处理．
（2）大肠杆菌的纯培养包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段．
（3）常用的微生物的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法．

解答 解：（1）配制培养基时各种成分在熔化后分装前必须进行pH的调节，接种前要进行高压蒸汽灭菌．
（2）①题干所述接种方法为平板划线法．
②平板划线法接种培养微生物时，需要进行不接种的空白培养实验以判断培养基是否被污染，所以用该方法统计样本菌落数时需要设置对照组．
（3）①大肠杆菌属于细菌，对抗生素敏感，培养大肠杆菌时不能用加入抗生素的方法防止杂菌感染．
②平板划线法分离大肠杆菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是线条的末端的细菌数量少，最终可以得到由单个细菌繁殖而形成的菌落．
③调查结果属于原核生物，酵母菌属于真核生物，它们最本质的区别是大肠杆菌无成形的细胞核．
故答案为：
（1）调节pH   高压蒸汽灭菌法
（2）①平板划线法
②是    需要判断培养基是否被污染
（3）①不可
②线条的末端的细菌数量少，最终可以得到由单个细菌繁殖而形成的菌落
③大肠杆菌无成形的细胞核

点评 微生物的实验室培养是选修一的重点内容，考生需要对各个知识点进行归纳总结，做题才能得心应手．