Question

14．目前市场上最主要的胰岛素产品是第二代胰岛素，相比第一代的动物源胰岛素，第二代胰岛素采用基因工程技术生产，其结构与人体内自身的胰岛素结构一致，最为安全有效．有关第二代胰岛素生产过程的叙述，错误的是（　　）

• A． 需用适当的酶对载体与人胰岛素基因进行切割与连接
• B． 若将基因表达载体导入大肠杆菌，需用Ca²⁺处理大肠杆菌
• C． 可通过检测受体细胞是否含有胰岛素基因来检测目的基因是否导入成功
• D． 人胰岛素基因必须能在受体细胞内进行复制与转录，才能合成胰岛素

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、基因工程中需要用限制酶切割外源DNA分子和运载体，其次需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA分子，A正确；
B、将目的基因导入微生物细胞可采用感受态转化法，即用Ca²⁺处理微生物细胞，使之成为感受态细胞，B正确；
C、可通过检测受体细胞是否含有胰岛素基因来检测目的基因是否导入成功，C正确；
D、人胰岛素基因必须能在受体细胞内进行复制、转录和翻译，才能合成胰岛素，D错误．
故选：D．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作步骤等，掌握操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项．