Question

回答有关遗传信息的传递和表达的问题．
肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制．该基因工程技术基本流程如图1．请回答下列下列问题．

（1）进行过程①时，需用到的酶有

 

．
（2）下列关于继续培养过程的说法错误的是

 

（多选）
A．可以用血清或淋巴液作为培养基
B．应该将培养温度控制在37℃左右
C．培养基PH值范围5.6～5.8
D．培养过程应用了细胞分化的原理
研究发现，let-7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图2．在基因工程中，通常可以用分子杂交技术（即用同位素或荧光标记的基因单链DNA片段进行杂交）来判断目的基因是否在受体细胞中表达．
（3）据图2分析，可从细胞中提取

 

进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录．肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中

 

（RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起．
（4）下列四幅图中能正确反映目的基因转录产物内部结构的是

 

．
TSS：转录起始位点，TTS：转录终止位点，STC：起始密码子，SPC：终止密码子

（5）研究人员用DNA测序仪显示了RAS基因某片段的碱基排列序列图片．其中图3的碱基排列顺序已经解读，碱基顺序是：GGTTATGCGT，请解读图4显示的碱基排列顺序：

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析图1：图1表示利用基因工程技术将let一7基因导入肺癌细胞的流程，其中①表示基因表达载体的构建过程；②表示用胰蛋白酶处理组织细胞，使之成为单个细胞，再加细胞悬液进行细胞培养的过程．
分析图2：图2表示let-7基因影响癌基因RAS的表达的原理，let-7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合，使RAS基因翻译受到抑制，引起细胞中的RAS蛋白含量减少，进而导致癌细胞增殖受到抑制．

解答： 解：（1）图中①表示基因表达载体的构建过程，需用到的酶有限制性核酸内切酶（或限制酶）和DNA连接酶．
（2）A．继续培养过程可以用血清或淋巴液作为培养基，A正确；
B．继续培养过程应该将培养温度控制在37℃左右，B正确；
C．培养基PH值范围7.35～7.45，C错误；
D．培养过程应用了细胞增殖的原理，D错误．
本题选错误的，故选：CD．
（3）判断目的基因是否在受体细胞中转录，可用分子杂交技术来检测，从细胞中提取mRNA和用放射性同位素或者荧光标记的目的基因单链DNA片段进行杂交．根据题中信息“肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌”知，导入let-7基因后，肺癌细胞的增殖受到抑制；据图2可知，let-7基因影响RAS基因表达的机理是：let-7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合，使RAS基因翻译受到抑制，引起细胞中的RAS蛋白含量减少，进而导致癌细胞增殖受到抑制．
（4）在目的基因的起始端有启动子，末端有终止子，因此转录形成的mRNA初始位置为TSS（转录起始位点），在末端位置有TTS（转录终止位点）；同时mRNA将作为蛋白质合成的直接模板，因此其中含有起始密码子和终止密码子控制翻译过程的进行，两个密码子分别位于TSS内侧和TTS内侧．故选：D．
（5）图3为DNA测序仪显示的某真核生物DNA片段一条链的碱基排列顺序图片．图3的碱基排列顺序已经解读，其顺序是：GGTTATGCGT，所以图中碱基序列应从下向上读，且由左至右的顺序依次是ACGT，所以图4中碱基序列为：GATGCGTTCG．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶（或限制酶）和DNA连接酶
（2）CD
（3）RNA（说明：不能具体写图2中的某种RNA----若能直接提取就没有检测的必要了）       RAS蛋白
（4）D
（5）GATGCGTTCG

点评：本题以图形为载体，主要考查基因工程的原理和技术、遗传信息的转录和翻译、DNA分子结构特点等相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或的能力，有一定的难度．