Question

20．如图为质粒限制酶酶切图谱，β-葡萄糖苷酶基因（bglB）不含图中所示的限制酶识别序列．研究人员在构建bglB基因表达载体时，应先选择限制酶，然后在扩增的bglB基因两端分别引入相应限制酶的识别序列，才能完成质粒和目的基因的重组．以下关于选择限制酶的说法，错误的是（　　）
（注：图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同）

• A． 选用限制酶Ndel或BamHI都能够获得所需的重组质粒
• B． 选用限制酶Xbal获得的重组质粒不一定能表达出β-葡萄糖苷酶
• C． 选用限制酶Pstl不能将bglB基因导入受体细胞
• D． 同时选用限制酶NdeI和BamHI，可避免目的基因与质粒反向连接

Answer 1

分析 基因表达载体的构建：
（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用．
（2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因
①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质．
②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端，终止子的作用是使转录在所需要的地方停止．
③标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因．

解答 解：A、由于限制酶Ndel和BamHI都位于启动子和终止子之间，所以选用限制酶Ndel或BamHI都能够获得所需的重组质粒，A正确；
B、由于Xbal在质粒不止一个酶切位点，选用限制酶Xbal获得的重组质粒不含终止子，所以不一定能表达出β-葡萄糖苷酶，B正确；
C、选用限制酶Pstl能将bglB基因导入受体细胞，但由于破坏了抗生素抗性基因，不利于检测重组质粒是否导入，C错误；
D、由于图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同，所以同时选用限制酶NdeI和BamHI，可避免目的基因与质粒反向连接，D正确．
故选：C．

点评 本题考查了基因工程的相关知识，意在考查考生的识图分析能力和理解判断能力，难度适中．考生要能够识记目的基因存在于启动子和终止子之间，属于识记和理解层次的考查．