Question

【题目】苏云金杆菌能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图。据图回答下列问题：

（1）将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有___________种DNA片段。

（2）假设图中质粒上BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ识别位点的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，那么该图中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割吗?___________（填“能”或“不能”），理由是______________________。若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒________。

A.既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开

B.能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开

C.既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开

D.能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开

（3）实际操作中最常用___________法将重组质粒导入植物受体细胞。种植转基因植物，它所携带的目的基因可能传递给非转基因植物，造成基因污染。把目的基因导入植物的___________DNA中，就可以有效避免基因污染，原因是_______________________________。

Answer 1

【答案】 4 能 切割后的黏性末端相同 D 农杆菌转化法 叶绿体（线粒体/细胞质） 叶绿体（线粒体/细胞质）中的基因不会通过花粉传给下一代

【解析】本题以图文结合的形式综合考查学生对基因工程等知识的识记和理解能力。解答本题的关键是熟记并理解基因工程的基本工具及其操作程序并形成清晰的知识网络。在此基础上，依据图示中限制酶切割位点的位置等信息，准确定位数字所示过程并结合问题情境进行相关问题的解答。

(1) 图中①的DNA含有两个BamHⅠ的酶切位点，含有一个HindⅢ的酶切位点，所以用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切①中的DNA后，反应液中有4种DNA片段。

(2) BamHI 切割后露出的黏性末端是，BclⅠ切割后露出的黏性末端是，即BamHⅠ和BclⅠ切割DNA后露出的黏性末端相同，因此假设图1中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图1中①的DNA右侧仍能选择BamHⅠ进行切割，并能获得所需重组质粒。质粒和目的基因都被HindⅢ切割，形成相同的黏性末端，则形成的重组质粒仍能被HindⅢ切割；质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，则形成的黏性末端是，而目的基因被BamHⅠ切割形成的黏性末端是，因此用BamHⅠ和BclⅠ酶切后获得的黏性末端再用DNA连接酶连接所形成的重组DNA片段是，则该片段不能被BamHⅠ识别，也不能切割。综上分析，根据酶切位点和识别的碱基序列可知，重组质粒只能被能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开， A、B、C三均错误，D正确。

(3) 将重组质粒导入植物受体细胞，在实际操作中最常用农杆菌转化法。由叶绿体（线粒体/细胞质）中的基因不会通过花粉传给下一代，所以把目的基因导入植物的叶绿体（线粒体/细胞质）DNA中，就可以有效避免因种植转基因植物而导致的基因污染。