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    8．图1为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图．图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离，1Kb=1000个碱基对长度．请据图回答：

    （1）质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是缺少标记基因、复制原点被限制酶切割．
    （2）如果是两两重组，可能有3种长度的重组结果．
    （3）基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤．现运用EcoRⅠ酶切质粒，完全酶切后进行电泳观察，若出现长度为1.1kb和5.6kb，或者3.1kb
    和3.6kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计）．
    （4）将筛选含有目的基因的重组质粒导入大肠杆菌的载体可以是AC（多选）．
    A．质粒         B．动物病毒        C．噬菌体       D．植物病毒
    （5）为了筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌，首先将大肠杆菌在培养基上培养，得到如图示2的菌落．再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图3的结果（空圈表示与图2对照无菌落的位置），挑选目的菌的位置为图1培养基中对应图2中消失的菌落．

    分析 1、基因表达载体由启动子、终止子、标记基因和目的基因组成．
    2、基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．
    3、限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．基因工程中常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
    分析题图：如图所示为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段示意图．图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因．EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离．

    解答 解：（1）由图可知，质粒A中缺少标记基因，质粒C中的复制原点被酶切割，所以A、C不能作为运载体．
    （2）用DNA连接酶连接时，可能出现质粒环化、目的基因环化、形成重组质粒，有3种长度的结果．
    （3）根据题意，质粒长度为2.7kb，目的基因长度为4.0kb，所以重组质粒长度为6.7kb，出现长度为1.1kb，则另一个长度为5.6kb，若目的基因重组时倒置，可形成3.1kb和3.6kb的片段．
    （4）基因工程中常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒，故导入大肠杆菌的载体可以是质粒和噬菌体．
    （5）为了筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌，首先将大肠杆菌在培养基上培养，得到如图乙的1的菌落说明质粒已经导入．再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图乙的2的结果，无菌落的位置表示不抗氨苄青霉素，说明为重组质粒，故挑选目的菌的位置为图1培养基中对应图2中消失的菌落．
    故答案为：
    （1）缺少标记基因    复制原点被限制酶切割           
    （2）3
    （3）EcoRⅠ5.6       3.1       3.6           
    （4）A C
    （5）氨苄青霉素      图1培养基中对应图2中消失的菌落

    点评 本题考查基因工程，意在考查考生能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题．

    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    （2）根据图二分析，当入侵病毒的蛋白质与图中寄主细胞表面的MHC结合，寄主细胞才能成为效应T细胞识别出的靶细胞．效应T细胞与靶细胞密切接触依赖细胞膜上的B物质，B物质的化学本质是糖蛋白．物质A由T细胞分泌，又能诱导生成更多T细胞，则这是一个（正）反馈调节过程，物质A为淋巴因子．
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    A．子链与母链间形成氢键B．黏性末端之间形成氢键
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    D．果酒发酵过程中其主要作用的是附着在果皮上的野生酵母菌

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