Question

【题目】食品安全国家标准GB 4789．40—2016是奶粉中可能含有的细菌克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）的检测标准，其流程如下，请回答：

（1）①过程中的BPW培养基为_________（填“固体”“液体”或“半固体”）培养基。

（2）②选择培养时，mLST - Vm培养基中添加的万古霉素是一种抗生素，分析可得，克罗诺杆菌属对该抗生素_____________（填“敏感”或“不敏感”）。

（3）由于②的培养产物细菌浓度未知，为避免对其进行稀释的工作，从②转移至③培养时，需采用的接种方法为_____________________。③过程所需的显色培养基在制备时的次序是______________________。

A．调节pH B．称量药品 C．溶解 D．倒平板 E．灭菌

（4）倒平板时一般将培养基温度降至_______℃左右。培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，其操作顺序应该是_____________。

①加水②排冷气③装置灭菌物品④100kPa下灭菌⑤加盖⑥0kPa下排气，打开灭菌锅．

（5）克罗诺杆菌属能产生黄色素，积累到一定量的时候，可使整个菌落呈现黄色，据此，除注释中的成分外，TSA培养基中还应包含________________。

（6）食品安全关系每个人的生命，对一种细菌的鉴定程序也相当严格。在上述检验程序中，步骤________________（填序号）对克罗诺杆菌属具有一定的选择或鉴定作用。

Answer 1

【答案】液体 不敏感 划线（接种）法； BCAED 50 ①③⑤②④⑥ 琼脂（或琼脂糖） ②③④⑤

【解析】

1．培养基的成分包括水、无机盐、碳源、氮源等。

2．制备固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤。

3．选择培养基的原理：根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。

（1）要扩大培养，一般为液体培养基。

（2）本实验的最终目标是筛选出克罗诺杆菌属，因此步骤②中的万古霉素需要将克罗诺杆菌属保留下来，并尽可能多的杀灭其他杂菌，因此克罗诺杆菌属对万古霉素不敏感。

（3）检测样品中的细菌数量不确定，因此，经过①②培养后，菌液中的密度大小不确定，若采用涂布分离法，需要一个合适的稀释浓度，这样增大了操作流程，为避免对菌液进行稀释的工作流程，可采用划线法进行接种，因为接种环在平板上划线到末端时，一般可形成单菌落，由分析可知，制备培养基的基本流程为计算、称量、溶解、调节pH、灭菌以及倒平板，故制备培养基的流程为BCAED。

（4）倒平板时一般将培养基温度降至50℃左右。培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，其操作顺序应该是①加水，③装置灭菌物品，⑤加盖②排冷气④100kPa下灭菌⑥0kPa下排气，打开灭菌锅。

（5在TSA培养基上最后要提取菌落，TSA培养基是固体培养基，配方中应该含有琼脂。

（6）国家安全标准相当严格，上述流程中的②③④⑤在一定程度上都在对克罗诺杆菌属进行选择或鉴定，以确保检测的准确性。