回答关于基因工程的问题
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病,目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗,过程如下图所示
(1)口蹄疫病毒的VP1蛋白进入动物体内,能引起机体产生特异性免疫反应。VP1蛋白在免疫反应中称为 。
(2)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA,要获得VP1基因可用 的方法合成DNA,再用限制性核酸内切酶将VP1基因片段切下。
(3)如下图所示,若用2种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从合成的DNA上切下VPI目的基因,并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb,1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域 (0.2kb),那么所形成的重组质粒pZHZ2___________。
A.既能被E也能被F切开 B.能被E但不能被F切开
C.既不能被E也不能被F切开 D.能被F但不能被E切开
(4)已知在质粒pZHZl中,限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.8kb,限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O.5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品,据下表所列酶切结果判断VPI目的基因的大小为 kb;并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在下图中。
(5)上述目的基因模板链中的TGA序列对应1个密码子,翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是 。
(6)过程⑥的培养基中除了加入各种必需营养物质和 等激素外,还需要添加 筛选出含有重组质粒的叶片小段。
(7)获得表达VP1蛋白的番茄植株以后,需要进行免疫效力的测定。具体方法是:将转基因番茄叶片提取液注射到豚鼠体内,每半个月注射1次,3次后检测豚鼠血液内产生的 的数量。为了使结果可信,应设2组对照,分别注射 和 。
(1)抗原
(2)逆转录
(3)A
(4) 1.2
(5)UGA
(6)生长素和细胞分裂素 卡那霉素
(7)特异性抗体 未转基因的番茄叶片提取液 弱毒疫苗
【解析】
试题分析:(1)能引起机体产生特异性免疫反应成为抗原;(2)由RNA指导合成DNA的过程称为逆转录,DNA指导合成RNA称为转录;(3)一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子,完全不同的限制酶E和F从合成的DNA上切下VPI目的基因,并将之取代质粒pZHZ1(上相应的E—F区域 (0.2kb),所以重组质粒中同时含有EF切割位点,答案选A;(4)由酶切结果可推测目的基因内部也有限制酶G和H的识别位点,设限制酶G的识别位点距E点有a kb,距F点有bkb;限制酶H的识别位点距E点有c kb,距F点有dkb;则有0.8+a=1.6,d+0.5=1.2;GH大半环之间距离为3.7-0.2-0.8-0.5=2.2,有b+0.5+2.2=3.1,c+0.8+2.2=3.5,a=0.8、b=0.4、c=0.5、d=0.7,a+b=c+d=1.2。
(5)根据碱基配对原则,TGA序列对应的密码子是ACU,密码子ACU对应的tRNA上的反密码子是UGA。(6)过程⑥为植物组织培养,需要的植物激素包括生长素和细胞分裂素等。(7)本实验的自变量为是否注射含有VP1蛋白的提取液;未转基因的番茄叶片提取液不含VP1蛋白。要证明VP1蛋白起疫苗的作用,可设置注射弱毒疫苗的对照组做比较。
考点:本题旨在考查基因工程的原理及技术、基因工程的应用和细胞工程的有关内容,意在考查关注对科学、技术和社会发展有重大影响和意义的生物学新进展以及生物科学发展史上的重要事件,理论联系实际,综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题。
科目:高中生物 来源:2011届上海市宝山区高三上学期期末考试生物试卷 题型:综合题
回答下列关于基因工程的问题
下图1是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线,表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图2、图3中箭头表示相关限制酶的酶切位点。
(1)若对图2中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性如何变化,为什么?
(2)图中将人乳铁蛋白基因插入质粒,可以只用EcoR I同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因,也可以使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因,后一个方法的优点在于可以防止 。
(3)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入 酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
(4)图1过程①可采用的操作方法是 ,过程②可采用的生物技术是 。过程③可采用的生物技术是 。
(5)分别从分子水平简述雌性转基因牛分泌人乳铁蛋白的过程是_______________。
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科目:高中生物 来源:2012-2013学年江苏省高三最后一次模拟考试生物试卷(解析版) 题型:综合题
回答下列关于基因工程的问题。
草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,最终导致植物死亡。但是,它的使用有时也会影响到植物的正常生长。目前,已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入植物细胞内,从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。
下图A-F表示6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过了转基因处理,但是是否成功还未知。图1和2分别表示两段DNA序列。表格中1-4分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点。据图回答下列问题:
.
(1)若A-C浇清水,D-F浇的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成长的是_________。
(2)若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲,在大肠杆菌培养基中还必须加入 ___________。
(3)假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图I所示,则应选择表中酶__________进行酶切;若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图I和II所示,则应选择表中酶__________ 进行酶切。
(4)假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图II所示,请在方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列。(2分)
(5)假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F仍没有表现出抗性,分析可能的原因_______________________________________________________________。
下图甲是某目的基因(4.0kb,1kb=1000对碱基)与大肠杆菌pUC18质粒(2.7kb)重组的示意图。图中Ap′是抗氨苄青霉素基因,lacZ是显色基因,其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧,其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色。(图乙中深色圆点即为蓝色菌落)
(6)图乙的培养基中含有氨苄青霉素,请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中,何种会含有重组质粒。___________。
(7)现用EcoRI酶切质粒,酶切后进行电泳观察,若出现长度为_________kb和 kb的片段,则可以判断该质粒已与目的基因重组成功。(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽略不计)
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科目:高中生物 来源:河北省2009—2010学年度第二学期期中考试高二生物试卷 题型:综合题
回答下列关于基因工程的问题:
如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图,所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因,质粒A导入细菌B后,其上的基因能得到表达,根据图示所给信息回答下列问题:
(1)将目的基因和质粒结合形成重组质粒时,用同一种限制性内切酶分别切割目的基因和质粒,露出相同的黏性末端,将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的 ,使质粒与目的基因结合成重组质粒。
(2)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高;导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒;有的导入的是普通质粒A;只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒:
将得到的细菌涂抹在一个含有 的培养基上,能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的,反之则没有。此过程中体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件 ; 。
(3)若进一步鉴定证明细菌中导入的是普通质粒A还是重组质粒,将得到的细菌涂抹在一个含有
的培养基上培养,若细菌 ,则导入的是普通质粒。如果利用DNA分子杂交原理来证明此过程,应该用 作为探针。
(4)使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内,主要是借鉴 的途径。
(5) 目的基因表达成功后,“工程菌”明显不同于细菌D。从变异的来源看,此变异属于
。导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么? 。
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科目:高中生物 来源:2010-2011学年上海市宝山区高三上学期期末考试生物试卷 题型:综合题
回答下列关于基因工程的问题
下图1是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线,表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图2、图3中箭头表示相关限制酶的酶切位点。
(1)若对图2中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性如何变化,为什么?
(2)图中将人乳铁蛋白基因插入质粒,可以只用EcoR I同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因,也可以使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因,后一个方法的优点在于可以防止 。
(3)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入 酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
(4)图1过程①可采用的操作方法是 ,过程②可采用的生物技术是 。过程③可采用的生物技术是 。
(5)分别从分子水平简述雌性转基因牛分泌人乳铁蛋白的过程是_______________。
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