Question

【题目】下图甲表示限制酶EcoR I的识别序列和切割位点，图乙表示DNA片段，图丙表示质粒及限制酶的切割位点。下列分析正确的是（ ）

A.目的基因被EcoR I切割后将产生序列为—TTAA的平末端

B.限制酶作用于图乙中的①，DNA连接酶作用于②和③

C.用HindⅢ和Pst I两种限制酶切割质粒，不会影响含目的基因的受体细胞的筛选

D.用PstI和EcoR I两种限制酶切割质粒，有利于目的基因与质粒正确连接

Answer 1

【答案】D

【解析】

分析题图：甲图中限制酶切割完成后形成的黏性末端为—TTAA；乙图中①是氢键，③是磷酸二酯键；丙图四环素和青霉素抗性基因为标记基因，其他为限制酶切割位点。

A、当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA分子的两链分别切开时，产生的是黏性末端，当限制酶在它识别序列中心轴线处切开时，产生的是平互末端，由图，目的基因被EcoR I切割后将产生序列为—TTAA的黏性末端，A错误；

B、限制酶和DNA连接酶作用于相邻脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键即图中③处化学键，B错误；

C、HindⅢ和Pst I两种限制酶切割位点分别位于四环素和青霉素抗性基因部位，抗性基因为标记基因，其作用是便于目的基因的鉴定和筛选，C错误；

D、用PstI和EcoR I两种限制酶切割质粒，可以防止质粒自身的环化，有利于目的基因与质粒正确连接，D正确。

故选D。