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基因工程利用某目的基因(图甲)和Pl噬菌体载体(图乙)构建重组DNA。限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ、EcoR I和Sau3A I。下列分析错误的是

A.构建重组DNA时,可用BglⅡ和Sau3A I切割目的基因和Pl噬菌体载体

B.构建重组DNA时,可用EcoR I和Sau3A I切割目的基因和Pl噬菌体载体

C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoR I切割后,含有2个游离的磷酸基团

D.用EcoR I切割目的基因和P1噬菌体载体,再用DNA连接酶连接,只能产生一种重组DNA

 

【答案】

D

【解析】

试题分析:P1噬菌体载体是双链环状DNA分子,所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键,故不含游离的磷酸基团,从图2可以看出,质粒上只含有一个SmaⅠ的切点,因此被改酶切割后,质粒变为线性双链DNA分子,因每条链上含有一个游离的磷酸基团,因此切割后含有两个游离的磷酸基团;C正确。从图甲看出,用EcoR I切割目的基因后两端各有一切口,与图乙中EcoR I切口对接时,可有两种可能,即可产生两种重组DNA;D错误。

考点:本题考查基因工程的相关知识,是学生提升获取图示信息、审题、分析能力的较好选择。

 

练习册系列答案
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科目:高中生物 来源:2012-2013学年湖南省益阳市一中高二上学期期末考试理科生物试卷(带解析) 题型:综合题

降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,将人工合成的降钙素DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功的在大肠杆菌中得以表达。操作大体过程如下图1、图2,据图回答下列问题:   

(1)图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA。从功能看,Klenow酶是一种___________酶,合成的双链DNA有________个碱基对。
(2)图2将重组质粒导入大肠杆菌最常用的方法是用       处理,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
(3)如果要通过基因工程获得转基因动物,将目的基因导入受体细胞最常用的方法是             
(4)以下关于蛋白质工程的说法正确的是(  )
A.蛋白质工程以基因工程为基础          
B.蛋白质工程就是酶工程的延伸
C.蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造  
D.蛋白质工程只能生产天然的蛋白质

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科目:高中生物 来源:2015届吉林省高二上期期末考试生物卷(解析版) 题型:综合题

请回答基因工程方面的有关问题:

(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链 DNA 片段,它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物 A 的 DNA 片段所占的比例为________。

②在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA 片段。

(2)设计引物是 PCR 技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。

①第 1 组:________________________;

②第 2 组:________________________。

(3)PCR反应体系中含有热稳定 DNA 聚合酶,下面的表达式不能正确反映 DNA 聚合酶的功能,这是因为____________________________________________________________。

(4)用限制酶 EcoRV 、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒,得到的 DNA 片段长度如下图(1 kb 即 1 000 个碱基对),请画出质粒上 EcoRV 、MboⅠ的切割位点。

 

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科目:高中生物 来源:2012-2013学年浙江省高三高考仿真模拟理科生物试卷 题型:综合题

肺细胞中的let一7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let一7基因导入肺癌细胞实现表达增强后,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

(1)进行过程①时,需用             酶切开载体以插入let一7基因。进行过程②时,需用         酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于 细胞培养。采用PCR技术扩增let一7基因时,在PCR反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶和引物l和引物Ⅱ等,若在该反应体系中,目的基因扩增了5代,则具有引物I的DNA所占的比例理论上为       

(2)研究发现,let一7基因能影响癌基因RAS的表达,其影响机理如图2。据图分析,可从细胞中提取    进行分子杂交,以直接检测1et一7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中    (RASmRNA/RAS蛋白质)含量减少引起的。

(3)现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子,用限制酶切开后得到仍是长度为1000 bp的DNA分子,说明此DNA分子的形态为                 

(4)某线性DNA分子分别用限制酶Hind Ⅲ和Sma I处理,然后用这两种酶同时处理,得到如下片段(kb为千个碱基对):

限制酶

    片段及长度

Hind Ⅲ

    2.5 kb,5.0 kb

Sma I

    2.0 kb,5.5 kb

Hind Ⅲ和Sma I

    2.5 kb,3.0 kb,2.0 kb

可以推知限制酶Hind Ⅲ和Sma I在此DNA分子中分别有            个识别序列。两酶同时处理后得到的片段,再用限制酶EcoR I处理,结果导致凝胶上3.0 kb的片段消失,产生一种1.5 kb的新片段;那么如果用限制酶HindⅢ和EcoR I将该线性DNA分子进行切割,则可得到长度分别为           的片段。

 

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科目:高中生物 来源:2014届湖南省益阳市高二上学期期末考试理科生物试卷(解析版) 题型:综合题

降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,将人工合成的降钙素DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功的在大肠杆菌中得以表达。操作大体过程如下图1、图2,据图回答下列问题:   

(1)图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA。从功能看,Klenow酶是一种___________酶,合成的双链DNA有________个碱基对。

(2)图2将重组质粒导入大肠杆菌最常用的方法是用       处理,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。

(3)如果要通过基因工程获得转基因动物,将目的基因导入受体细胞最常用的方法是             

(4)以下关于蛋白质工程的说法正确的是(  )

A.蛋白质工程以基因工程为基础          

B.蛋白质工程就是酶工程的延伸

C.蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造  

D.蛋白质工程只能生产天然的蛋白质

 

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科目:高中生物 来源:2010年广东省高二上学期期中考试生物试卷 题型:综合题

(每空2分,共11分)请分析回答基因工程的相关问题:

(1)(3分)基因工程的理论基础是         法则,可用公式(图解)表示为        

                              。?

(2)(4分)利用PCR技术(全称:                    )可以扩增目的基因,即在试管中进行DNA的人工复制获得大量DNA克隆分子。某样品DNA中共含有3000个碱基对,碱基数量满足:(A+T):(G+C)=1 :2,现计划通过PCR得到100个与样品相同的DNA,至少需要向试管中加入          个腺嘌呤脱氧核苷酸。

(3)(4分)为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对)

第一步水解

产物

(单位bp)

第二步水解

产物

(单位bp)

A酶切割

1900

将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割

1700  200

1500

800  700

1600

1100 500

 

由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为         个和         个。

 

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