Question

13．基因工程发展迅猛，进入二十一世纪的第二个十年，新的技术不断提出、发展，如锌指核酸酶、TALEN技术、CRISPR/Cas9技术等．2015年末，英国医生用基于TALEN技术的基因疗法，成功治愈了小女孩莱拉（Layla）的白血病；2016年3月11日，科学家宣布用CRISPR方法根除了已整合到人体细胞染色体上的HIV病毒．回答下列问题：
（1）基因工程实现了定向改造生物性状；基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；获得目的基因的方法有：基因文库法、PCR法和人工合成法．进行PCR时，加入反应体系的引物决定了目的DNA被扩增的片段．
（2）现代基因工程有关人类疾病、发育的研究，主要实验材料是诱导多能干细胞（iPS cells）．实验室大量培养iPS细胞所需的条件有：无菌无毒的环境、营养、温度和PH、气体环境．iPS细胞是用体细胞经过诱导成为具有分裂、分化能力，类似胚胎干细胞的一类细胞．相比于直接使用胚胎干细胞，iPS细胞的使用避免了伦理\道德\法律等问题．

Answer 1

分析 基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，其中核心步骤为基因表达载体的构建．
基因工程中获得目的基因的方法：①从基因文库中获取； ②利用PCR技术扩增； ③人工合成（化学合成）．

解答 解：（1）基因工程能够定向改造生物性状；基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；获得目的基因的方法有：基因文库法、PCR法和人工合成法．进行PCR时，由于引物上的碱基序列与目的基因的片段能够碱基互补配对，因此加入反应体系的引物决定了目的DNA被扩增的片段．
（2）实验室大量培养iPS细胞所需的条件有：无菌无毒的环境、营养、温度和PH、气体环境．iPS细胞是用体细胞经过诱导成为具有分裂、分化能力，类似胚胎干细胞的一类细胞．相比于直接使用胚胎干细胞，iPS细胞的使用避免了伦理\道德\法律等问题．
故答案为：
（1）定向、基因表达载体的构建、基因文库法、人工合成法、引物．
（2）无菌无毒的环境、气体环境、伦理\道德\法律

点评 本题考查了基因工程以及细胞工程的有关知识，要求考生能够识记基因工程的操作步骤以及目的基因获得的一般方法，识记动物细胞培养的培养条件，再结合题干要求答题．