回答下列问题:(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤.其中的核心步骤是基因表达载体的构建,(2)若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞.先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中.然后用该农杆菌感染植物细胞.通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体DNA上．植物组织培养的主要原理是植物细胞具有全能性.具体过� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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9．回答下列问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是基因表达载体的构建；
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体DNA上．植物组织培养的主要原理是植物细胞具有全能性，具体过程是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过去分化（脱分化）产生愈伤组织等，最终形成完整的植株．
（3）动物细胞培养所用培养液为合成培养基，但该培养基中往往要加入一些血清、血浆等天然成分．动物细胞培养所需气体主要有O₂和CO₂，CO₂的主要作用是维持培养液的pH．
（4）在哺乳动物的核转移实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内．
（5）在“试管牛”的培育过程中，采用激素处理可使良种母牛一次排出多枚卵母细胞，最常用的激素是促性腺激素．从良种公牛采集的精子需获能后才能进行受精作用；防止多精入卵的两道屏障依次为透明带反应、卵细胞膜反应．
（6）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项）：物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理．

分析 1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的PH）．
3、生态工程的基本原理：
（1）物质循环再生原理：物质能在生态系统中循环往复，分层分级利用；（2）物种多样性原理：物种繁多复杂的生态系统具有较高的抵抗力稳定性；
（3）协调与平衡原理：生态系统的生物数量不能超过环境承载力（环境容纳量）的限度；
（4）整体性原理：生态系统建设要考虑自然、经济、社会的整体影响；
（5）系统学和工程学原理：系统的结构决定功能原理：要通过改善和优化系统结构改善功能；
系统整体性原理：系统各组分间要有适当的比例关系，使得能量、物质、信息等的转换和流通顺利完成，并实现总体功能大于各部分之和的效果，即“1+1＞2”．

解答解：（1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建．
（2）农杆菌转化法：先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体DNA上．植物组织培养的主要原理是植物细胞具有全能性，具体过程是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过去分化（脱分化）产生愈伤组织等，最终形成完整的植株．
（3）动物细胞培养所用培养液为合成培养基，但该培养基中往往要加入一些血清、血浆等天然成分．动物细胞培养所需气体主要有O₂和CO₂，CO₂的主要作用是维持培养液的pH．
（4）胚胎移植时，需要将胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段，再将胚胎移入受体（代孕）动物体内．
（5）给母畜注射促性腺激素可促使其超数排卵；精子需要经过获能处理才能受精；防止多精入卵的两道屏障依次为透明带反应、卵细胞膜反应．
（6）生态工程遵循的基本原理：物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建
（2）T-DNA     染色体DNA    全能性     无菌      去分化（脱分化）
（3）血清、血浆     维持培养液的pH
（4）桑椹胚或囊胚
（5）促性腺激素    获能    透明带反应     卵细胞膜反应
（6）物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理

点评本题考查基因工程、细胞工程、胚胎工程和生态工程的相关知识，要求考生识记课本中基本知识，能构建知识网络，再结合所学的知识准确答题．

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