Question

（15分）[生物——选修3：现代生物科技专题] Ⅰ.土壤农杆菌能将自身Ti质粒的T-DNA整合到植物染色体DNA上，诱发植物形成肿瘤。T-DNA中含有植物生长素合成酶基因（S）和细胞分裂素合成酶基因（R）,如图1所示，它们的表达与否能影响相应植物激素的含量，进而调节肿瘤组织的生长与分化。基因工程常用Ti质粒作为运载体，图2表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A、B、C的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布，抗虫基因内部不含切割位点，两侧标明序列为切割区域。

（1）据图2分析，切取抗虫基因时，使用限制酶 ，切割Ti质粒时，使用限制酶 。

（2）成功建构的重组质粒含有限制酶A的识别位点0个，若用酶C处理该重组质粒，将得到 个DNA片段。

（3）若抗虫基因插入的位置在R基因内部，筛选出 植株即是成功导入抗虫基因的棉花植株。

Ⅱ.单克隆抗体技术在生物工程中占有重要地位。请回答相关问题：

（4）科学家米尔斯坦和柯勒提出单克隆抗体制备技术的实验方案：把一种 细胞与能在体外大量增殖的___________细胞进行诱导融合，使融合细胞既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体。

（5）在技术操作中，需要将融合细胞用 培养基进行筛选，并进行克隆化培养和 检测，以得到足够数量的符合要求的 （填“单”、“双”、“多”）核杂交瘤细胞。

（6）若将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，可从 中提取出大量的单克隆抗体。

（7）研究人员应用 ，改造了鼠源性抗体分子的结构，降低了鼠源性抗体的人体反应。

Answer 1

Ⅰ. (1)酶B和酶C 酶A和酶B （2）2 （3）生根瘤

Ⅱ.（4）B淋巴 骨髓瘤 （5）特定的选择性（必答“选择”） 抗体检测 单

（6）（细胞）培养液 （7）蛋白质工程

【解析】

试题分析：Ⅰ.（1）分析图2可知，抗虫基因左侧序列中含有酶B的识别序列，右侧含有酶C的识别序列，所以切去目的基因应使用限制酶B和酶C；Ti质粒的T-DNA区段含有酶A和酶B的识别位点，所以切割Ti质粒时，使用限制酶A和酶B。

（2）成功构建的重组质粒用酶C处理能得到2个DNA片段，应是A-C和C-A片段。

（3）若抗虫基因插入的位置在R基因内部，则R基因结构被破坏失去原有的功能，即R基因不表达；但S基因正常表达，所以根据图1可知筛选出生根瘤植株即是成功导入抗虫基因的棉花植株。

Ⅱ.（4）米尔斯坦和柯勒在单克隆抗体制备时，把经过免疫的B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行诱导融合，使融合细胞既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体。

（5）操作中，需要将融合细胞用特定的选择性培养基进行筛选，并进行克隆化培养和抗体检测，以得到足够数量的符合要求的单核杂交瘤细胞。

（6）若将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，可从细胞培养液中提取出大量的单克隆抗体。

（7）应用蛋白质工程，可以改造鼠源性抗体分子的结构，降低鼠源性抗体的人体反应。

考点：本题考查基因工程、单克隆抗体及蛋白质工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。