Question

20．如图为利用农杆菌转化法培育转基因抗虫棉的技术流程图． 请据图回答：

（1）图中A为基因表达载体，在构建该结构时，Bt毒蛋自基因与Ti质粒结合的部位是T-DNA片段内．
（2）①过程是将基因表达载体转移到农杆菌细胞内，经采用的方式是用钙离子处理．
（3）通过植物个体水平上的抗虫接种实验，才能最终确定是否成功培育出了抗虫棉植株．

Answer 1

分析 1、农杆菌转化法的具体过程：
（1）利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体，即将目的基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上．
（2）将整合了目的基因的Ti质粒导入土壤农杆菌细胞内．
（3）利用土壤农杆菌感染植物细胞，该过程实际上是将含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒导入植物细胞内．
（4）含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒进入植物细胞后，可以把自己的一段基因整合到细胞核中的染色体上，这段基因中包含了目的基因．
2、原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．

解答 解：（1）图中A为基因表达载体；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，在构建基因表达载体时，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．
（2）①过程是将基因表达载体转移到农杆菌细胞内；将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法，即是用钙离子处理微生物细胞，使之处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态．
（3）通过植物个体水平上的抗虫接种实验，才能最终确定是否成功培育出了抗虫棉植株．
故答案为：
（1）基因表达载体      T-DNA片段内
（2）将基因表达载体转移到农杆菌细胞内     用钙离子处理
（3）植物个体水平上的抗虫接种

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题．