Question

【题目】牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于增强体质。生牛奶需要经过消毒处理，达到国家检测标准方可饮用。以下是生牛奶消毒及细菌检测实验示意图，请据图回答：

（1）培养基中的牛肉膏可以为微生物主要提供______（填两个），在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中，完成加水、装锅、加热排气、保温保压适当时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表______时，打开排气阀，旋开固定螺栓，开盖，才可以取出灭菌的培养基等物品。

（2）步骤②是______，若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可釆用的接种方法是______。

（3）将接种后的培养基和作为对照的______同时放入37 ℃恒温培养箱中，培养36小时。为避免培养基污染，需将培养皿呈______状态放置。取出后统计各平板的菌落数，菌落数分别为 67、 65 和63，细菌数大约是______/mL。运用这种方法统计的结果往往较实际值______(填“偏大”或“偏小”)，原因是______。

Answer 1

【答案】碳源、氮源、维生素等 压力降为零（指针指向“0”点） 系列稀释(或梯度稀释) 稀释涂布平板法 未接种的培养基 倒置 6.5ⅹ105个 偏小 当两个或多个菌落重叠在一起时按一个菌落计算

【解析】

识图分析可知，图中①过程为巴氏消毒法，对牛奶在80℃进行消毒15min；②过程为对菌液进行梯度稀释的操作，根据图中结果可知对菌液稀释了1000倍，步骤③表示吸取0.1ml的菌液涂布在培养基上，采用稀释涂布平板法进行计数微生物的数量。

（1）培养基中的蛋白胨可以为微生物的生长提供碳源、氮源和维生素。常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，灭菌的过程中，完成加水、装锅、加热排气、保温保压适当时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表压力降为零时，打开排气阀，旋开固定螺栓，开盖，才可以取出灭菌的培养基等物品。

（2）图中步骤②是系列稀释(或梯度 稀释)。若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可釆用步骤③所示的稀释涂布平板法对目的菌进行接种。

（3）将接种后的培养基和作为对照的一个未接种的培养基同时放入37℃恒温培养箱中培养3小时在倒平板操作中，待平板冷却疑固后将平板呈倒置状态放置，可以使培养皿表面的水分更好地挥发，又可以防止皿 盖上的水珠落入培养皿，对造成培养基污染。按图示步骤②稀释1000倍后接种，取岀后各平板的菌落数分别 为67、 65 和63，则细菌数大约是(67+65+63)÷3×10×1000= 6.5×105个/mL。运用稀释涂布平板法对微生物进行的计数统计的结果往往较实际值偏低，因为对菌落计数时，当两个或多个菌落重叠在一起时按一个菌落计算，导致计数结果偏低。