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    4．基因编辑技术指对目标基因进行“编辑”，实现对特定DNA 片段的敲除、加入等．继CRSPRI/Cas9 系统基因编辑技术风靡全球实验至后，我国韩春雨研究团队提出了NgAgo-gDNA 基因编辑工具，但却引起了科学界的质疑．为了探究NgAgo-gDNA 系统能否引发斑马鱼的Fabplla基因发生突变导致其眼睛发育缺陷，复旦大学和南通大学联合进行了研究．请回答下列问题．
    （1）探究一：NgAgo-gDNA 系统能否使斑马鱼眼睛缺陷？
    方法：首先推测构成NgAgo 蛋白的氨基酸序列，在试管中合成mRNA，并将其与单链gDNA 混合后注射到斑马鱼胚胎细胞中，进行胚胎培养．培养液需含有葡萄糖、氨基酸、核苷酸、无机盐、有机盐、维生素和动物血清（或动物血浆）等．小斑马鱼的形成不需要（填“需要”或“不需要”）进行胚胎移植．单链gDNA 与Fabplla 基因的碱基互补配对与Fabplla 基因转录时的碱基互补配对相比，区别是前者碱基A-T配对，后者碱基A-U配对．
    结果：实验组斑马鱼胚胎出现了严重的眼睛缺陷．
    （2）探究二：斑马鱼眼睛缺陷是否是由Fabplla 基因发生突变引起的？
    方法：从异常眼部表现型的斑马鱼胚胎细胞中提取Fabplla 基因，对其使用PCR 技术进行扩增，并研究该基因在斑马鱼胚胎发育中的功能．PCR 技术扩增Fabplla 基因时，需要提供模板、原料、热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）、引物等条件．将模板DNA 加热至90～95℃，该处理的目的是使目的基因DNA受热变性后解旋为单链．
    结果：NgAgo-gDNA 系统引发的眼睛缺陷可通过外源添加Fabplla 基因的mRNA 来恢复，而且对Fabplla 基因测序结果发现其序列与对照组相同．
    初步结论：斑马鱼眼睛缺陷是由Fabplla基因转录受阻导致的，而非基因突变引起的．
    （3）转基因技术是一把双刃剑，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来灾难．面对转基因技术可能产生的负面影响，公众不可避免地产生了疑虑，引发了人们在食物安全、生物安全和环境安全 三个方面发生激烈的争论．

    分析 1、PCR技术的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．
    2、发育培养基的成分：无机盐和有机盐，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质．
    3、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）．

    解答 解：（1）要探究NgAgo-gDNA系统能否使斑马鱼眼睛缺陷，首先推测构成NgAgo蛋白的氨基酸序列，在试管中合成mRNA，并将其与单链gDNA混合后注射到斑马鱼胚胎细胞中，进行胚胎培养．为了保证营养全面，培养液中还需要添加动物血清（或动物血浆）等．鱼不是胎生动物，因此小斑马鱼的形成不需要进行胚胎移植．单链gDNA与Fabplla基因的碱基互补配对（A-T、T-A、C-G、G-C）与Fabplla基因转录时的碱基互补配对（A-U、T-A、C-G、G-C）相比，区别是：前者碱基A-T配对，后者碱基A-U配对．
    （2）要探究斑马鱼眼睛缺陷是否是由Fabplla基因发生突变引起的，可采用PCR技术，即从异常眼部表现型的斑马鱼胚胎细胞中提取Fabplla基因，对其使用PCR技术进行扩增，并研究该基因在斑马鱼胚胎发育中的功能．PCR技术扩增Fabplla基因时，需要提供模板、原料、热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）、引物等条件．将模板DNA加热至90～95℃，该处理的目的是使目的基因DNA受热变性后解旋为单链．
    结果：NgAgo-gDNA系统引发的眼睛缺陷可通过外源添加Fabplla基因的mRNA来恢复，而且对Fabplla基因测序结果发现其序列与对照组相同．
    初步结论：斑马鱼眼睛缺陷是由 Fabplla基因转录受阻导致的，而非基因突变引起的．
    （3）转基因技术的安全性问题包括食物安全、生物安全和环境安全三个方面．
    故答案为：
    （1）氨基酸序列      动物血清（或动物血桨）  不需要    前者碱基A-T配对，后者碱基A-U配对
    （2）热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）  使目的基因DNA受热变性后解旋为单链        斑马鱼眼睛缺陷是由 Fabplla基因转录受阻导致的，而非基因突变引起的
    （3）环境安全

    点评 本题考查PCR技术、动物细胞培养、转基因生物的安全性问题，要求考生识记PCR技术的条件；识记动物细胞培养的条件；识记转基因动物的安全性问题，能结合所学的知识准确答题．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源：2015-2016学年广东省梅州市高二上第一次月考理科生物试卷（解析版） 题型：选择题

    一条染色单体含有一个双链DNA分子，细胞有丝分裂后期的细胞中一条染色体含有（ ）

    A．一个单链DNA分子 B．两个双链DNA分子

    C．一个双链DNA分子 D．四个双链DNA分子

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    17．下列对有关生物学实验的叙述中，错误的是（　　）
    A．调查蒲公英的种群密度适合采用样方法
    B．鉴定脂肪和观察植物细胞的有丝分裂都需要用到酒精
    C．西瓜瓢中富含还原糖，适合作为鉴定还原糖的实验材料
    D．用低温或秋水仙素处理都可以诱导产生多倍体植株且原理相同

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    12．细胞周期包括分裂间期（分为G1期、S期、G2期）和分裂期（M期）．DNA复制发生于S期，若抑制DNA复制则细胞不能分裂而停留在S期．为探究两种抗癌药物A和B的作用效果，用A和B单独处理体外培养的肝癌细胞，测定其细胞周期各阶段细胞所占比例及细胞凋亡率，结果如表所示．根据表中信息分析不正确的是（　　）
    组别细胞周期细胞凋亡率（%）
     
    G1（%）S（%）G2+M（%）
    对照组32.7122.0145.285.29
    药物A34.1263.152.7318.14
    药物B90.276.543.1931.86
    A．肝癌细胞的细胞周期中分裂间期时间长于分裂期
    B．推测药物A的作用机理是阻断S期DNA的复制
    C．药物B的作用机理必定是抑制G1期蛋白质合成
    D．A、B两种药物联合使用可能会提高癌症治疗效果

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    19．下列关于物质跨膜运输的叙述，正确的是（　　）
    A．雌性激素需通过胞吐的方式从卵巢中分泌出来
    B．神经元细胞兴奋时，细胞内大量的K+向外扩散
    C．分泌蛋白在内质网和高尔基体之间的转运是单向的
    D．肾小管上皮细胞重吸收水和葡萄糖均属于被动运输

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    9．如图为线粒体的内膜上发生的生理过程．NADH将有机物降解得到的高能电子传递给质子泵，后者利用这一能量将H+泵到线粒体基质外，使得线粒体内外膜间隙中H+浓度提高，大部分H+通过特殊的结构①回流至线粒体基质，同时驱动ATP合成．下列叙述正确的是（　　）
    A．上述过程中能量转化过程是有机物中稳定化学能→电能→ATP中活跃化学能
    B．H+经质子泵被泵到线粒体基质外属于协助扩散
    C．H+有膜间隙向线粒体基质的跨膜运输属于主动运输
    D．硝化细菌在合适条件下可以发生上述过程

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    16．现有一未受人类干扰的森林，某研究小组考察了该森林处于食物链最高营养级的某种动物的年龄组成．回答下列问题：
    （1）通常，种群的年龄结构大致可分为三种类型，分别是增长型、稳定型和衰退型．根据种群的年龄结构可以预测种群数量的变化趋势．
    （2）如果要调查该森林中某种鸟的种群密度，常用的方法是标志重捕法．用该种方法调查种群密度时，若调查的结果偏大，可能原因有部分标志物脱落；标记个体更容易被捕食、该种鸟被捕捉一次后更难被捕捉．
    （3）一般来说，若要演替到相对稳定的森林阶段，发生森林火灾后进行的演替比初生演替所需的时间短，其主要原因是原有土壤条件基本保留，甚至还保留了植物的种子或其他繁殖体．
    （4）在该森林中，能量沿食物链流动时，所具有的两个特点是单向流动、逐级递减．在该森林中相距500米的一只雄鼠和一直未孕雌鼠通过信息素发现了对方，这种现象主要体现了生态系统具有信息传递功能．

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    科目：高中生物 来源：2015-2016学年广东省高三上9月考生物试卷（解析版） 题型：综合题

    0℃以上的低温可对喜温植物玉米造成伤害．为探究低温对不同玉米品种叶绿素含量及根系脱氢酶活性的影响，进行以下实验：

    实验步骤：

    ①从甲、乙、丙三个品种中挑选具有2～4片叶、长势相同的玉米幼苗，平均分成三组，分别放在低温5℃（处理1）、10℃（处理2）及常温25℃（处理3）的环境中培养4天．

    ②在培养期间分别测定并记录叶绿素含量及根系脱氢酶活性．

    实验结果如图所示：

    请回答：

    （1）为提取玉米叶片中的叶绿素，需要在研钵中加入 （物质）．

    （2）图1表明，低温处理下玉米幼苗的叶绿素含量 ．

    （3）经研究发现脱氢酶活性需K+激活．图2表明低温处理下玉米幼苗的根系脱氢酶活性 ，因为低温抑制了根系的 ，根细胞主动吸收K+所需的 减少，导致脱氢酶难以被激活．

    （4）根据图1与图2，可以判断：甲，乙，丙三个品种中 最耐低温．

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    生殖隔离的形成包括（ ）

    ①动物因求偶方式和繁殖期不同造成不能交配 ②植物因开花季节和形态不同而不能交配 ③动物胚胎发育早期死亡 ④产生的杂种后代没有生育能力．

    A．①② B．①②③ C．①②④ D．①②③④

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