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16.大菱鲆是我国重要的海水经济鱼类.研究性学习小组尝试对大菱鲆消化道中的蛋白酶的活性进行研究.
(1)查询资料得知,18℃时,在不同pH条件下大菱鲆消化道各部位蛋白酶活性如图1.由图可知,在各自最适pH下,三种蛋白酶催化效率最高的是幽门盲囊蛋白酶.“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品(汉水丑生2012-7-
(2)资料表明大菱鲆人工养殖温度常年在15-18℃之间.学习小组假设:大菱鲆蛋白酶的最适温度在15-18℃间.他们设置15℃.16℃.17℃.18℃的实验温度,探究三种酶的最适温度.
①探究试验中以干酪素为底物.干酪素的化学本质是蛋白质,可用双缩脲试剂鉴定.
②胃蛋白酶实验组和幽门盲囊蛋白酶实验组的pH应分别控制在2和8.
③将装有酶和底物的试管置于水浴中以保持恒温一段时间.
④实验结果如图2,据此不能确认该假设成立,理由是:据图可知随着温度提高酶活性逐步提高,酶活性峰值未出现.
(3)研究还发现大菱鲆消化道淀粉酶和脂肪酶含量少、活性低,所以人工养殖投放的饲料成分中要注意降低淀粉、脂肪的比例,以减少对海洋的污染.

分析 本题是关于温度、PH对蛋白酶活性影响和蛋白质检测的综合性题目,分析题图1可知,不同的蛋白酶的最适宜PH可以不同,在各自最适宜PH条件下幽门盲囊蛋白酶、胃蛋白酶、肠蛋白酶的活性依次降低;探究酶的最适宜温度时,自变量是温度,因变量是底物消耗量(产物生成量),PH是无关变量应保持适宜,对于温度这一自变量的控制可以通过水浴来保持恒温,酶有其最适宜温度,在最适宜温度之前,酶的活性会随温度升高而升高,超过最适宜温度后,酶的活性随温度升高而降低.

解答 解:(1)分析题图曲线可知,在各自最适pH下幽门盲囊蛋白酶的活性最高,其催化效率最高.
(2)①本题实验目的是大菱鲆消化道中蛋白酶的活性进行研究,酶的作用具有专一性,蛋白酶催化蛋白质水解,实验中以干酪素为底物,说明干酪素的本质是蛋白质;由于双缩脲试剂与蛋白质发生反应呈现紫色,因此可以用双缩脲试剂检测干酪素的本质.
②分析题图1可知,胃蛋白酶和幽门盲囊蛋白酶实的最适宜pH分别是2和8,探究酶的最适温度,PH是无关变量,无关变量应保持一致且适宜,因此胃蛋白酶实验组和幽门盲囊蛋白酶实验组的pH应分别控制在2和8.
③为了控制实验温度,装有酶底物的试管应置于水浴中以保持恒温.可以用单位时间内底物消耗量或产物生成量表示蛋白酶催化效率的高低.
④在最适宜温度之前,酶的活性会随温度升高而升高,超过最适宜温度后,酶的活性随温度升高而降低,而题图2中酶的活性随温度升高而升高,未出现峰值,因此根据图2实验结果不能得出酶的最适宜温度是15一18℃.
(3)由于大菱鲆消化道淀粉酶和脂肪酶含量少、活性低,大菱鲆消化和吸收淀粉与脂肪的能力低,因此人工养殖投放的饲料成分中要注意降低淀粉和脂肪的含量,以减少对海洋的污染.
故答案为:
(1)幽门盲囊蛋白酶
(2)①蛋白质       双缩脲
②2和8
④据图可知随着温度提高酶活性逐步提高,酶活性峰值未出现
(3)淀粉、脂肪

点评 本题的知识点是温度、PH对酶活性的影响,酶作用的专一性,蛋白质的检测方法,酶活性在生产中的应用,对曲线分析获取有效信息是解题的关键,根据题干信息分析出实验目的、原理及实验变量并控制好变量是本题的重点.

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②将培养瓶放于37℃、5%CO2培养箱中培养24h,静置、去除上清液;
③分别加入等量但含不同浓度SW的培养液,于37℃、5%CO2培养箱中继续培养;
④分别在24h、48h、72h时吸取培养液,观察结果,得到不同浓度SW对细胞存活率影响曲线(如图).
请回答:
(1)处于间期的肝癌Hepal-6细胞,其分子水平的主要变化是DNA复制和有关蛋白质的合成.
(2)③实验要设置对照组,对照组的处理方法应为不加SW处理,加等量培养液(或只加等量培养液).步骤③中每个实验组设置5个培养瓶同时进行培养,计数后统计平均值,这是为了减少误差,使实验结果更可信.
(3)分析图1中曲线可知,SW对肝癌Hepal-6细胞作用效果的特点是:
①SW浓度越高,对细胞生长(存活)的抑制作用越强;
②SW作用时间越长,对细胞生长(存活)的抑制作用越强.
(4)将培养48h的培养液离心,去除上清液后经过一系列的处理及分析,得到下表结果:
表:培养48h细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量
SW癌细胞数目凋亡细胞数目Bax蛋白Bcl-2蛋白
2微克/ml++++++++++
1微克/ml++++++++++
0.5微克/ml++++++++++
0微克/ml++++++++++
注:“+”的数量表示相对值的多少
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