Question

【题目】青蒿素主要从青蒿植株的地上部分提取而来，是最有效的抗疟药之一，最新研究表明，青蒿素还可用于糖尿病的治疗．研究人员利用基因工程培育出高产的转基因青蒿．
（1）青蒿的cDNA文库，是以从青蒿细胞中提取的为模板，通过（方法）建立起来的．青蒿的cDNA文库（是/否）含有青蒿基因组中的全部基因吗？
（2）研究人员从青蒿的cDNA文库中获取了合成青蒿素所需的两种关键酶的基因．在对这两个目的基因分别进行PCR时，向反应体系中加入Taq酶等物质中，除了模板不同，也肯定不同．
（3）构建表达载体时，应在两个目的基因的首端和尾端分别安插上和 ， 使目的基因能够 ． 构建好的目的基因表达载体一般通过法而导入到青蒿细胞中，最终获得转基因植株．
（4）有人另辟蹊径，成功培育出能生产青蒿素的转基因酵母菌．试指出利用转基因酵母菌生产青蒿素的两点优势： ．
（5）操作过程中需要用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如图（1kb 即1000个碱基对），请在直接在下图的质粒上画出EcoRⅤ、MboⅠ的切割位点．

Answer 1

【答案】
（1）mRNA；反转录；否
（2）引物（对）
（3）启动子；终止子；转录（或表达）；农杆菌转化
（4）酵母菌繁殖快，易培养，成本低，可以工业化生产，生产不受季节、气候、地域限制
（5）
【解析】解：（1）cDNA文库是以mRNA为模板，通过反转录的方法建立起来的．cDNA文库属于部分基因文库，其只含有青蒿基因组中的部分基因．（2）采用PCR技术扩增目的基因的条件是：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．因此，对这两个目的基因分别进行PCR时，向反应体系中加入的物质中，除了模板不同，引物也肯定不同．（3）基因表达载体的组成包括启动子、终止子、目的基因和标记基因等，因此构建表达载体时，应在两个目的基因的首端和尾端分别安插上启动子和终止子，使目的基因能够表达．将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法．（4）利用转基因酵母菌生产青蒿素的优势：酵母菌繁殖快、易培养、成本低可以工业化生产、生产不受季节、气候、地域限制．（5）根据图示，该质粒为环形质粒．用限制酶EcoRⅤ单独切割该质粒时，只形成一个片段，说明该质粒上只有1个限制酶EcoRⅤ的识别位点．用限制酶MboⅠ单独切割该质粒时，形成两个片段，说明该质粒上有两个限制酶MboⅠ的识别位点．用限制酶EcoRⅤ和MboⅠ联合切割该质粒时，形成三个片段，其中有一个片段的长度与用MboⅠ单独切割该质粒时产生的片段长度相同（2.5kb），另外的两个片段是5.5kb和6kb，这说明限制酶EcoRⅤ的切割位点存在于用MboⅠ单独切割该质粒时产生的另一片段（11.5kb）上． 所以答案是：（1）mRNA；反转录；否；（2）引物（对）；（3）启动子；终止子；转录（或表达）；农杆菌转化；（4）酵母菌繁殖快，易培养，成本低，可以工业化生产，生产不受季节、气候、地域限制；（5）
【考点精析】关于本题考查的基因工程的原理及技术，需要了解基因工程的原理是利用DNA重组技术才能得出正确答案．