探究如何从土壤中分离自生固氮菌并计数.实验原理:农田的表层土壤中.自生固氮菌的含量比较多.将用表层土制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养.在这种情况下.只有自生固氮菌才能生长繁殖.材料用具:农田的表层土壤.无氮培养基.牛肉膏蛋白胨培养基.盛9 mL无菌水的大试管若干.无菌移液管.无菌涂布器.无菌培养皿.盛90 mL无菌水的锥形瓶.酒� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

探究如何从土壤中分离自生固氮菌并计数。

实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表层土制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。

材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9 mL无菌水的大试管若干、无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱。

方法步骤：

（1）倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，应在_________________________操作。

（2）制备土壤稀释液。取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌移液管吸取上清液 1 mL，转至9 mL无菌水的大试管中，依次稀释到107倍稀释度。为实现无菌操作，试管口和移液管应在离火焰 cm处。

（3）涂布。按照由107～103稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布3个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布个平板。

（4）培养。放入恒温箱内，在适宜温度条件下培养3～4d。一般每隔24h统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止。

（5）细菌的计数。选取菌落数在30～300的平板进行计数。如果测试的平均值为50，则每克样品中的菌株数是。（稀释度是105）

（6）预期结果。相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数（填“多于”或“少于”）无氮培养基上的数目。理由是_____________________________________________________________（2分）。

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