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【题目】发的小麦种子中α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶的含量显著增高.α﹣淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6、0℃下可迅速失活,而β﹣淀粉酶耐酸、不耐热,在70℃条件下15min后失活.根据它们的这种特性,可分别测定一种酶的催化效率.某实验小组进行了“提取小麦种子中α﹣淀粉酶并测定α﹣淀粉酶催化淀粉水解的最适温度”的相关实验. 实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1cm).
主要试剂及仪器:1mg/mL的标准麦芽糖溶液、5%的可溶性淀粉溶液、碘液、蒸馏水、石英砂、恒温水浴锅等.
实验步骤:
步骤一:制备酶溶液.

步骤二:____________________________ , 取出后冷却.
步骤三:取6支干净的、体积相同并具刻度的试管依次编号,按如表要求加入试剂,再观察各试管内的颜色变化.(注:+表示碘液变蓝色,﹣表示碘液不变色)

试管编号

1

2

3

4

5

6

5%的可溶性淀粉溶液(mL)

8

8

8

8

8

8

恒温水浴5min(℃)

0

20

40

60

80

100

α﹣淀粉酶保持活性而β﹣淀粉酶失去活性的溶液(mL)

1

1

1

1

1

1

恒温水浴5min(℃)

0

20

40

60

80

100

溶液混合,振荡后恒温水浴5min(℃)

0

20

40

60

80

100

加入碘液,振荡后观察颜色变化

+++

++

+

++

+++

请回答下列问题:
(1)选用萌发的小麦种子提取酶液的主要理由是
(2)步骤二的具体操作是
(3)该实验中能否选用斐林试剂检测实验结果?(能/不能).理由是
(4)若要进一步研究小麦种子中β﹣淀粉酶的最适温度,则需获得β﹣淀粉酶保持活性而α﹣淀粉酶失活的酶溶液.请简要写出制备该种酶溶液的方法.

【答案】
(1)小麦种子萌发时形成大量的淀粉酶(α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶)
(2)将酶液置于70℃水浴中15 min下的环境中
(3)不能;利用斐林试剂检测时需要水浴加热,会改变该实验中的温度,影响实验最终结果
(4)将步骤一中制取的酶液置于pH为3.6,温度为0℃下的环境中(短暂时间,使α﹣淀粉酶失去活性)
【解析】解:(1)小麦种子中含淀粉丰富,萌发时形成大量淀粉酶;(2)该实验测定α﹣淀粉酶催化淀粉水解的最适温度,因此要使取得的酶液中的β﹣淀粉酶失去活性,而根据α﹣淀粉酶较耐热,β﹣淀粉酶不耐热的特性,在70℃条件下将获得的酶液处理15 min,可使酶液中的β﹣淀粉酶失活;(3)由于利用斐林试剂检测时需要水浴加热,会改变了该实验中的自变量(温度),影响实验最终结果,所以不能选用斐林试剂检测实验结果.(4)根据α﹣淀粉酶不耐酸,在pH为3.6、0℃下可迅速失活,而β﹣淀粉酶耐酸的特性,只需将步骤一中制取的酶液置于pH为3.6,温度为0℃的环境中短暂时间,使α﹣淀粉酶失去活性,即可得到β﹣淀粉酶保持活性而α﹣淀粉酶失活的酶溶液. 所以答案是:(1)小麦种子萌发时形成大量的淀粉酶(α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶)(2)将酶液置于70℃水浴中15 min下的环境中(3)不能 利用斐林试剂检测时需要水浴加热,会改变该实验中的温度,影响实验最终结果(4)将步骤一中制取的酶液置于pH为3.6、温度为0℃下的环境中(短暂时间,使α﹣淀粉酶失去活性)
【考点精析】利用探究影响酶活性的因素对题目进行判断即可得到答案,需要熟知pH: 在最适pH下,酶的活性最高,pH值偏高或偏低酶的活性都会明显降低;温度: 在最适温度下酶的活性最高,温度偏高或偏低,酶的活性都会明显降低;酶的浓度、底物浓度、产物浓度的影响.

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