Question

为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效，老师带领生物兴趣小组的同学设计了如下实验（符合无菌操作要求）。请分析上述实验过程并回答下列问题：
①用无菌水漱口，向漱口液中加入适量的该中药牙膏；
②配制牛肉膏蛋白胨固体培养基；
③将上述样品接种到培养基上，在适宜条件下进行培养；
④一段时间后，对培养结果进行观察并进行菌落计数。

（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、____；培养基在分装前往往要进行____。

（2）本实验样品接种时最好采用____方法。培养一段时间后，培养基表面长出菌落，每一个标准菌落来源于样品中的____。

（3）食品安全检测时通常采用大肠杆菌作为致病微生物的指示菌，为测定哪些菌落属于大肠杆菌，可选用____培养基对菌落进行鉴定，大肠杆菌的菌落在该培养基上呈现黑色。

（4）请指出本实验设计中的一个明显的错误：____，请加以改正：____。

（5）如何证明所用培养基已经彻底灭菌？____。

Answer 1

（1）倒平板 高压蒸汽灭菌

（2）稀释涂布平板法 一个活菌

（3）伊红美蓝

（4）没有设置对照实验； 应将漱口液分为两份，一份加牙膏，一份不加牙膏分别接种培养

（5）对未接种的培养基进行培养，如无菌落出现，则证明培养基灭菌彻底

本题考查微生物培养技术，制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌，接种的方法一般有平板画线法和观察菌落时，一般用稀释涂布平板法，一个标准菌落是由一个细菌产生的。对大肠杆菌的鉴定一般采用伊红美蓝鉴别培养基进行，就设置对照实验，应将漱口液分为两份，一份加牙膏，一份不加牙膏分别接种培养，还要对未接种的培养基进行培养，如无菌落出现，则证明培养基灭菌彻底。