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    2．人类的遗传性疾病是很难用一般药物进行治疗的，基因工程的兴起迎来了基因治疗的曙光．基因治疗是将人的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用，从而达到治疗疾病目的生物医学高新技术．基因治疗的基本程序如图所示，请分析回答问题：
    （1）确认遗传性疾病的方法除了用基因芯片检测、生化分析等现代生物技术外，还可以通过家族系谱图（系谱调查法）方法来确定．
    （2）治疗性基因的获得除了用限制酶从正常人的基因组中分离出来外，还可以通过人工方法获取，请你写出一种人工方法的途径蛋白质工程法（或反转录法）等；为提高治疗性基因的数量，可以采取PCR技术．
    （3）靶细胞的选择也是非常重要的，你认为靶细胞一般应该有能分裂特点．
    （4）目前基因转移的方法是显微注射；在转导细胞的选择鉴定中，除了用基因探针来检测DNA、mRNA外，还需要检测目的基因的表达产物（蛋白质）；当检测出细胞中已经具有目的基因，需要通过动物细胞培养技术来增加细胞数量，然后再回输到病人体内．在上述培养基中通常需加入一种天然成分动物血清．

    分析 基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以达到治疗目的．也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中，使外源基因制造的产物能治疗某种疾病．

    解答 解：（1）确认遗传性疾病的方法除了用基因芯片检测、生化分析等现代生物技术外，还可以通过家族系谱图（系谱调查法）方法来确定．
    （2）治疗性基因的获得除了用限制酶从正常人的基因组中分离出来外，还可以通过人工方法获取，如从正常人的体细胞中获取目的基因的mRNA，经反转录获取目的基因．或利用蛋白质工程获取目的基因，基本途径是：预期蛋白质功能→设计预期蛋白质结构→推测氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列．为提高治疗性基因的数量，可以采取PCR技术扩增目的基因．
    （3）把目的基因导入靶细胞，在体外完成基因的转移，然后筛选成功转移的细胞，需要将细胞扩增培养再输回患者体内，故作为靶细胞必须有分裂能力．
    （4）将目的基因导入动物细胞一般用显微注射法，在转导细胞的选择鉴定中，除了用基因探针来检测DNA、mRNA外，还需要检测目的基因的表达产物（蛋白质），用动物细胞培养技术来增加细胞数量，然后再回输到病人体内．在上述培养基中通常需加入一种天然成分动物血清．
    故答案为：
    （1）家族系谱图（系谱调查法）
    （2）蛋白质工程法（或反转录法）等  PCR
    （3）能分裂 
    （4）显微注射  目的基因的表达产物（蛋白质） 动物细胞培养 动物血清

    点评 本题考查基因治疗，考查学生识记基因治疗概念、动物细胞培养、基因工程步骤、分析图形的能力、难度适中．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    3．豌豆种子的形状有圆滑和皱缩两种表现，某同学为了弄清楚哪个是显性性状，在实验中得到下列结果：（用B、b表示基因）
    （1）显性性状是：圆粒，亲本的基因型是：Bb和Bb
    （2）在所得种子中纯合子的比例是：$\frac{1}{2}$．
    （3）为了获得能稳定遗传的圆滑种子，应该进行多次自交，直到不再发生性状分离为止．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    13．运动时分泌大量汗液，在流经汗腺导管时大部分Na+、Cl-被重吸收，而水很少被重吸收，下列叙述正确的是（　　）
    A．出汗可使血浆渗透压降低B．出汗不利于体温维持稳定
    C．汗腺导管重吸收Na+需消耗ATPD．出汗使渗透压感受器兴奋减弱

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    10．请回答有关免疫问题．
    （1）特异性抗原被呈递给B细胞，B细胞识别后被活化、分化出的浆（或效应B细胞）细胞，制造大量的抗体分泌到血液中．
    （2）艾滋病是由人类免疫缺陷病毒（HIV）所引起的一种严重的传染性疾病，HIV进入人体后攻击的主要对象是T淋巴细胞．
    （3）如图表示将抗原注射兔体内后抗体产生量的变化．当注入抗原X，抗体产生量的变化是曲线A．若第8天，同时注射抗原Y和X，图中表示对抗原Y的抗体产生量是曲线是C；表示对抗原X的抗体产生量是曲线是B，其特点是第二次免疫应答反应快而强（或反应快，产生的抗体多），这是因为初次免疫反应时产生的记忆B 细胞的作用．若第8天不注射抗原X，则以后对抗原X的抗体产生量变化的是曲线D．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    17．表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答下列问题：

    限制酶序号①②③④⑤⑥
    限制酶AluⅠBamHⅠPstⅠEcoRⅠBglⅡHindⅢ
    识别序列及切割位点
    （1）分析表中6种限制酶识别的序列特点，其不同点是：不同酶识别的序列不同，共同点是：每一序列的双链反向阅读碱基序列相同（回文序列）．
    （2）限制酶②和⑤的切割后产生的黏性末端是一样的．（填限制酶的序号）
    （3）在用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时，不能使用EcoR I切割的原因是EcoRI会破坏质粒中的四环素抗性基因结构．
    （4）如果用限制酶HindⅢ与BamHI和DNA连接酶将图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时，则此过程可获得2种环状DNA．（只考虑质粒和目的基因之间的连接）
    （5）图2中的外源DNA用限制酶②和⑥同时切割，能产生3种DNA片段．
    （6）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的复制．
    （7）如果要初步筛选出导入上述重组质粒的某种细菌，则应该在培养基中加入适量四环素．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    7．对内环境的叙述，正确的是（　　）
    A．内环境指的是体液B．内环境指的是细胞外液
    C．内环境指的是细胞内液D．内环境指的是组织液、血液和淋巴

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    14．科学家对鼠源杂交瘤抗体进行改造（如图所示），生产出效果更好的鼠--人嵌合抗体，用于癌症治疗．请回答相关问题：

    （1）利用蛋白质工程技术对鼠源杂交瘤抗体进行改造时，首先必须根据预期嵌合抗体的功能，设计其结构，最终通过基因拼接，将鼠源抗体基因改造成鼠----人嵌合抗体基因，然后导入鼠淋巴细胞中使其表达．
    （2）与图中启动子相结合的酶是RNA聚合酶，终止子是转录的终点；嵌合载体中还应含有标记基因，以便重组DNA的鉴定和筛选．
    （3）图中“转染细胞”常用的方法是显微注射法；图中的“抗体分泌细胞”是杂交瘤细胞（或浆细胞或B细胞）．

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    11．艾滋病是一种危害性极大的传染病，病因是由于患者感染艾滋病病毒（HIV病毒）引起．如图1为艾滋病感染者体内HIV浓度和T细胞数量随时间的变化规律．请据图回答下列问题：
    （1）从免疫学角度分析，艾滋病是一种免疫缺陷病（免疫失调）病．被HIV病毒侵染的T淋巴细胞产生于骨髓这一免疫器官，并在胸腺部位成熟．除上述免疫器官外人体的免疫器官还包括骨髓、淋巴结、扁桃体、脾（至少答2个）等．
    （2）人体感染HIV病毒后，HIV的浓度先升高后下降，原因是人体的免疫系统产生了囊膜蛋白（Gp120，Gp41）抗体等多种抗体，大部分HIV被抗体消灭．图2是抗体形成的一般过程，写出以下字母代表的名称：e记忆B细胞（记忆细胞）；g淋巴因子．
    （3）艾滋病感染急性期会出现持续多日的发烧症状，此时患者的体内产热量=（填＞、=、＜）散热量，此过程中参与体温调节的激素主要有甲状腺激素、肾上腺素．
    （4）从图1可知，HIV浓度在第9年达到了峰值，患者此时通常会罹患多器官的恶性肿瘤，最终导致死亡．这一结果体现了免疫系统的功能之一是监控和清除．

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    12．某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因．利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图1所示，请回答下列问题．

    （1）将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状（变异性状）的来源属于基因重组．
    （2）在构建重组质粒时，应选用SalⅠ和HindⅢ（填SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ）两种酶对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性．
    （3）基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤．为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，图2表示运用影印培养法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）检测基因表达载体是否导入了农杆菌．培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有氨苄青霉素、四环素．
    从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是4和6（填序号）菌落中的细菌．为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测抗盐基因，又要用一定浓度的盐水浇灌烟草植株的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性．
    （4）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用植物组织培养技术，愈伤组织经细胞的增殖和分化进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加植物激素．
    （5）图3表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造．图4是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（图示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析：
    ①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入启动子．
    ②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的之一是去除质粒上的tms和tmr（基因），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长．
    ③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒．分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是在含卡那霉素的培养基中能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长．

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