【题目】牛奶是微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物。为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行如图所示操作。请回答下列问题。
（1）牛奶用巴氏消毒的好处是_________。
（2）图中所用培养基在灭菌过程中，需用到高压蒸汽灭菌锅。下面是关于高压蒸汽灭菌锅使用过程中的操作，正确的先后顺序是①②_________⑨。(有的操作可以重复)
①装入待灭菌物品 ②加盖 ③加热灭菌锅④打开排气阀 ⑤关闭排气阀 ⑥切断电源⑦压力表的压力降到零 ⑧打开盖子 ⑨取出灭菌物品
（3）取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上进行涂布，应选择的工具是下图中_________。
（4）图中所示方法为稀释涂布培养法，理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为65个、63个、64个，则可以推测酸奶中每毫升含细菌数为_________个，运用这种方法统计的结果往往较实际值_________ (偏大/偏小)，如果培养基上出现_________的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
（5）已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，要进一步分离纯化乳酸菌采用下图所示的划线分离操作，正确的是_________，其正确操作过程中，培养基在划线时划线工具至少要灼烧_________次。
【答案】牛奶的营养成分不被破坏（营养成分没有损失） ③④⑤⑥⑦④⑧ B 6.4×108 偏小 （形状、大小、颜色、光泽度）不同 B 5
【解析】
灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，适用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等。消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法，适用对象主要有操作空间、某些液体、双手等，稀释涂布平板法常用来进行微生物的计数。
（1）常用的消毒方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法。巴氏消毒的方法是指70-75℃煮30分钟或80℃煮15分钟，使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是牛奶的营养成分不被破坏。
（2）a.首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜；b.放回灭菌桶，并装入待灭菌物品；c.加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内；d.用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气；e.灭菌所需时间到后，切断电源或关闭煤气，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品．如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染；f.将取出的灭菌培养基放入37℃温箱培养24小时，经检查若无杂菌生长，即可待用。故高压蒸汽锅灭菌的操作步骤：①装入待灭菌物品，②加盖，③加热灭菌锅，④打开排气阀，⑤关闭排气阀，⑥切断电源，⑦压力表的压力降到零，④打开排气阀，⑧打开盖子，⑨取出灭菌物品。
（3）将液体菌种滴在培养基上进行涂布的方法是稀释涂布平板法，所用的接种工具是涂布器，即图中的B。
（4）由于图中稀释了106倍，牛奶中每毫升含细菌数为（65+63+64）÷3÷0.1×106=6.4×108个。由于经此方法接种培养时当两个或多个菌落重叠在一起时按一个菌落计算，所以运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小。如果培养基上出现（形状、大小、颜色、光泽度）不同的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
（5）要进一步分离纯化乳酸菌采用平板划线法进行操作，图中所示的平板划线分离的操作正确的是B图，接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成图4次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，以防止造成污染，因此完成图B划线共需灼烧接种环5次。
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【题目】人类各种癌症中的关键基因之一是原癌基因。研究发现,蛋白X是细胞膜上的一种受体,由原癌基因X编码,在一些肿瘤细胞中,原癌基因X过量表达会持续激活细胞内的信号传导,启动细胞DNA的复制,导致细胞异常增殖。
(1)同一个体各种体细胞来源于受精卵的分裂与分化。正常情况下,体细胞核遗传信息相同的原因是__________________________。
(2)通过检测原癌基因X的______和_______可判断其是否转录和翻译。检测成人多种正常组织后,发现原癌基因X只在乳腺、呼吸道等上皮细胞中有微弱表达,这说明________。
(3)根据以上信息,可推测原癌基因的主要功能是___________。
(4)苦马豆素(SW)因从灰苦马豆中分离出来而得名,被认为是“未来的肿瘤治疗药物”。以下是相关的实验研究过程及结果。
a.将等量的小鼠肝癌Hepal-6细胞悬液,分别接种于若干个含有等量培养液的培养瓶中;
b.将培养瓶放于37 ℃、5%CO2培养箱中培养24 h,静置,去除上清液;
c.分别加入等量但含不同浓度SW的培养液,于37 ℃、5%CO2培养箱中继续培养;
d.分别在24 h、48 h、72 h时吸取培养液,观察结果,得到不同浓度SW对细胞存活率影响曲线如图所示。
请回答下列问题。
步骤c中需要设置对照组,对照组的处理方法应为_________________。步骤c中每个实验组设置5个培养瓶同时进行培养,计数后统计平均值,这是为了_____,使实验结果更准确。
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【题目】下图是某同学设计的“探究酵母菌的呼吸方式”实验装置图，甲与乙中是含有酵母菌的葡萄糖溶液，1、2、3、4号试管加入适量水后再滴加2滴溴麝香草酚蓝溶液，用来鉴定CO2。对此实验的结果、分析与评价错误的是
A. 丙试管与乙试管相连，其作用是为乙试管提供充足的氧气
B. 应在甲试管中加1mL石蜡油，制造无氧环境
C. 为了适当简化装置，可以将图中的2号或4号试管除去
D. 1号试管与3号试管相比，出现黄色的时间要短
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【题目】下图是利用奶牛乳腺生产血清白蛋白的过程。下列有关叙述错误的是( )
A. 将牛组织置于清水中并加入一定量的胰蛋白酶处理可得到单细胞
B. 图中涉及基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、胚胎移植等技术
C. 选用未受精的卵细胞作为受体细胞是因为其具有让细胞核全能性得到表达的环境
D. 若要获得同卵双胎或多胎，分割囊胚时需将内细胞团均等分割
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【题目】植物基因工程中，往往用光诱导型启动子(PrbcS)使目的基因表达，其结合T基因后能使目的基因更高水平表达。下图中①和②都为基因表达载体构建过程中的中间载体，请分析重组载体的部分构建过程并回答下列问题：
注：Ampr/Kmr分别为氨苄青霉素/卡那霉素抗性基因。origin为复制原点，其余为限制酶酶切位点。
（1）对双子叶植物进行基因工程改造最常用的方法是____________，还需结合__________技术才能获得新性状的植株。
（2）中间载体通常用______________法导入微生物中扩增，含有中间载体②PrbcS*T的微生物________（“能”或“不能”）在含有卡那霉素的培养基中生长，________（“能”或“不能”）在含有氨苄青霉素的培养基中生长。
（3）经酶切后凝胶电泳，测得2B片段为0.4kb，经图示信息分析，Prbcs*T的长度约为____________________。据图分析，中间载体②2B形成中间载体②PrbcS*T，需要使用限制酶_________________切割。
（4）在T基因前“点突变引入NcoⅠ”酶切位点的方法是：设计包含_________识别序列的引物，然后用PCR技术扩增。
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【题目】在下面的遗传系谱图中，用■表示的男性含有变异的线粒体基因，下列选项中叙述错误的是（ ）
A. 变异的线粒体基因只能通过母亲遗传给后代
B. 变异的线粒体基因的遗传不符合分离定律
C. 变异的线粒体基因所在的DNA复制属于半保留复制
D. 该系谱图中含有变异线粒体基因共7人
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【题目】下列叙述中符合种群密度概念的是（ ）
A.某湖泊每平方米水面鲫鱼的数量
B.一亩水稻的年产量
C.每平方米草地中杂草的数量
D.某地区灰仓鼠每年新增的个体数
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【题目】镰刀型细胞贫血症是一种遗传病。患者的红细胞呈弯曲的镰刀状，容易破裂，使人患溶血性贫血，严重时会导致死亡。镰刀型细胞贫血症产生的根本原因是（ ）
A.基因重组B.染色体数目变异
C.基因突变D.染色体结构变异
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【题目】糖尿病是常见病，很多糖尿病患者需要终身注射胰岛素，故胰岛素的医用量极大，图2是通过生物工程生产胰岛素的两条途径，EcoRI、BamHI 和 Sau3AI 三种限制性内切酶的识别序列与切割位点如图1 所示，请据图回答相关的问题：
（1）质粒的基本组成单位是（______）。据图分析，为了高效重组，切割目的基因和质粒分子最为理想的限制酶是（_______）。
（2）途径 1 中涉及到的现代生物工程有____________（多选）。
A．细胞核移植B.动物细胞培养技术C.转基因技术 D. 动物细胞融合技术E.干细胞技术
（3）途径 2 中将胰岛素基因与质粒连接产物和受体细胞混合进行导入操作，之后还需要筛选，这是因为_________________。（多选）
A. 胰岛素基因和质粒连接形成重组质粒
B．胰岛素基因自我连接形成环状 DNA 分子
C．导入成功的概率很低，大部分大肠杆菌没有导入任何质粒
D．连接之后可能产生空质粒，导入后产生含有空质粒的大肠杆菌
（4）途径2中为了获得含重组质粒的大肠杆菌，应采用两步法筛选。其中用于第一步筛选的培养基成分，除了葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子之外，还应该加入的 物 质 有__________， 目的是筛选出含______________的大肠杆菌 。
（5）请根据生命科学中结构与功能相适应的观点，阐述途径 1 和途径 2 获得胰岛素的差异__________________________________________________________________________。
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