Question

【题目】大豆植株的DNA序列D能在基因A控制表达的转移酶作用下，从序列原本所在染色体的某个位置转移到其他位置，这种随机转移会导致突变。科研人员利用这一原理来构建稳定遗传的大豆突变体库，以获得稳定遗传的优良品种。

（1）科研人员分别将序列D和基因A作为_________，插入含卡那霉素抗性基因的农杆菌Ti质粒的_____上，利用转化植物，筛选得到转D植株和转A植株。将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用______处理细菌细胞以增加____________。

（2）将获得的外植体置于合适培养基中进行筛选，发生转化的外植体通过____________形成愈伤组织，再通过___________产生不定芽和体细胞胚再长出整个植物。培养过程中，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换___________。

（3）若能够在植物细胞中检测到转D和转A基因，_________(填“能”或“不能”)说明该基因工程项目获得成功。基因转化是否成功应对大豆植物进行________水平鉴定，以确定该变异能否遗传给后代。

Answer 1

【答案】 目的基因 T-DNA CaCl2 细胞壁的通透性 脱分化 再分化 培养液 不能 分子(或DNA)

【解析】分析题文描述可知：本题综合考查学生对基因工程的基本操作程序、植物组织培养的过程，特别是将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定等相关知识的识记和理解能力。

(1)依题意和图示分析可知：序列D和基因A均为目的基因。在利用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞之前，需将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的T-DNA上，此时需用CaCl2或Ca2+处理，以增大土壤农杆菌细胞壁的通透性，使其成为感受态细胞。

(2)置于合适培养基中进行筛选而获得的发生转化的外植体，需借助植物组织培养技术才能将其培育成植物体，其过程是：发生转化的外植体通过脱分化形成愈伤组织，再通过再分化产生不定芽和体细胞胚再长出整个植物。培养过程中应定期更换培养液，以便于清除代谢产物并防止细胞产物积累对细胞自身造成的危害。

(3) 若能够在植物细胞中检测到转D和转A基因，只能说明序列D和基因A成功导入并插入到受体细胞的DNA上，但不能说明序列D和基因A是否在受体细胞中成功表达，也就不能说明该基因工程项目获得成功。基因转化是否成功应对大豆植物进行分子(或DNA) 水平鉴定，以确定该变异能否遗传给后代。